栝楼丛生芽快繁体系建立.docVIP

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栝楼丛生芽快繁体系建立

栝楼丛生芽快繁体系建立   摘要:利用栝楼的嫩芽作为外植体,进行离体组织培养,通过正交试验选择最适pH值和激素浓度,筛选出栝楼丛生芽的最适诱导培养基。结果表明,消毒时间为3 min时外植体损伤较小;pH为5.8的培养基外植体长势旺盛;3号芽诱导培养基丛生芽比较旺盛;2号生根培养基得到的根多且壮。栝楼丛生芽的快速繁殖体系为:0.1%HgCl2 溶液外植体表面消毒3 min;丛生芽诱导的最适pH为5.8;最佳芽诱导培养基为:MS+0.5 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA;最佳芽生根培养基为:MS+ 0.2 mg/L NAA。   关键词:栝楼;嫩芽;组织培养;快速繁殖   中图分类号:S567.23+9 文献标识号:A 文章编号:1001-4942(2014)03-0046-03   AbstractThe in vitro tissue culture method of Trichosanthes kirilowii Maxim. was established using tender buds as explants. By orthogonal test, the optimum pH value, 6-BA and NAA concentrations, and the best induction medium of multiple buds were selected. The results showed that disinfecting for 3 minutes had less injury on explants. The explants grew well on the medium with pH of 5.8. The multiple buds in the third bud induction medium were vigorous. And the second rooting medium had more and stronger roots. In conclusion, the rapid propagation system of Trichosanthes kirilowii Maxim. for multiple buds induction was disinfecting explants for 3 minutes using 0.1% HgCl2;the optimum pH value was 5.8;the optimum bud induction medium was MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA; and the optimum rooting medium was MS+0.2 mg/L NAA.   Key wordsTrichosanthes kirilowii Maxim.; Tender bud; Tissue culture; Rapid propagation   栝楼 (Trichosanthes kirilowii Maxim.),为葫芦科多年生草质藤本植物,其根(中药名为天花粉)、种子(中药名为栝楼仁)、果实(中药名为栝楼实)、果皮(中药名为栝楼皮)均可入药,有化痰散结,治咳嗽、胸闷的功效,还能滑肠通便,治疗便秘[1~3]。栝楼是雌雄异株的植物,种子繁殖雌雄难辨,分根法繁殖系数较低,使良种生产发展受到一定的限制[5]。利用植物组织培养法进行快速繁殖,所需材料少,繁殖效率高,不受季节和气候的影响,还可以节约成本、生产脱毒苗等[6]。现有报道大多通过愈伤诱导进行栝楼快繁,存在变异率高,所需周期长等问题[7~9]。作者通过对组培快繁条件的探索,逐步建立起栝楼的丛生芽诱导体系,加快了栝楼无性繁殖的速度,而且通过丛生芽增殖的方式,保持了母本的优良特性,对于栝楼种苗的快速繁育具有重要意义。   1材料与方法   1.1试验材料   样品取自山东中医药大学药用植物园。经山东中医药大学教授周凤琴鉴定为葫芦科植物栝楼(Trichosanthes kirilowii Maxim.),4月初从植株上取当年生嫩芽做外植体。   1.2试验方法   1.2.1消毒时间的确定先用75%乙醇浸泡外植体1 min,再用灭菌水冲洗2次,并用0.1%HgCl2对外植体进行表面消毒,分为2组,分别消毒3 min和5 min;最后用灭菌水彻底冲洗外植体6~7次。超净工作台提前启动灭菌后,将外植体放在铺有灭菌滤纸的培养皿上,剪取长约1.5 cm的嫩芽,备用。   1.2.2pH值的确定配制培养基后调节pH值分别至5.8、5.9,观察不同pH值对丛生芽生长的影响。   1.2.3诱导芽分化培养基的确定以

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