HLAI类基因多态性与白血病易感性关联性研究.docVIP

HLAI类基因多态性与白血病易感性的关联性研究 【摘要】 目的 探讨白血病易感性与HLAI类基因多态性之间的关联性，寻找白血病的易感基因。方法 采用序列特异性寡核苷酸探针杂交技术(PCRSSO)对65例白血病患者和48例正常对照组健康者进行HLAA、B基因分型。结果 在等位基因HLAA、B中，白血病患者的HLAA01、B38基因的基因频率高于正常对照组(Plt;0.05)，而HLAA11基因的基因频率明显下降(Plt;0.05)。结论 基因A01、B38对白血病有遗传易感作用，而基因A11对白血病有遗传拮抗作用。 【关键词】 HLA；白血病；PCRSSO；多态性 　　Correlation between gene HLAclass I　polymorphism and susceptibility to leukemia 　　ABSTRACT: Objective To explore the correlation between gene HLAclass I polymorphism and susceptibility to leukemia in Chinese Gansu Han people and search for the genes susceptible to leukemia. Methods HLAA and B alleles polymorphism in 65 patients with leukemia and 48 normal subjects were determined by PCR with sequence specific oligucleotide probe (PCRSSO). Results The allele frequencies of HLAA01 and B38 were increased (Plt;0.05), while the allele frequencies of HLAA11 were decreased in patients with leukemia (Plt;0.05). Conclusion HLAA01 and B38 alleles seem to contribute to the genetic susceptibility to leukemia, while HLAA11 seems to contribute to its genetic resistance. 　　KEY WORDS: human leukocyte antigen (HLA); leukemia; PCRSSO; polymorphism 　　近30年来，尽管白血病的基础研究和临床疗效有了长足进展，但白血病的确切发病机制尚不清楚。多数学者认为，白血病除了与外界环境因素如物理、化学、生物等有关外，不同患者对白血病的遗传易感性及免疫功能不尽相同[1]，具有高度多态性。与抗原呈递和识别有关的人类白细胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)分子，可能是导致白血病的重要遗传因素之一[2]。本研究采用聚合酶链反应和序列特异性寡核苷酸探针(polymerase chain reactionsequence specific olignuliotide probe, PCRSSO)的方法，对甘肃省汉族白血病患者HLAI类基因A、B进行基因分型，研究其基因多态性与白血病的相关性。 　　1 材料与方法 　　1.1 研究对象 病例组：兰州大学第一医院1998-2006年收住的部分白血病患者65例，按照白血病的形态学免疫学细胞遗传学分子生物学(MICM)分型法诊断标准确诊。年龄在2-71岁，平均年龄30岁，其中男性45例，女性20例。正常对照组：按照随机原则，选取同时期同一地区48例与患者无血缘关系的正常健康者。年龄在18-50岁，其中男性26例，女性22例。白血病患者治疗前和对照组每例抽取外周血3mL， EDTA抗凝，放置于-20℃冰箱备用。 　　1.2 主要试剂和仪器 DNA提取试剂盒(德国QIAGEN公司)；SSOHLA分型试剂盒(英国Dynal公司)；2400型PCR仪(美国PE公司)；双槽恒温水浴摇床(美国Robbins Scientific公司)；台式低温高速离心机(德国Heraeus公司)；UV754型紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)。 　　1.3 方法 　　1.3.1 基因组DNA的提取 采用德国QIAGEN公司DNA提取试剂盒，从研究对象的病例组和正常对照组全血中提取基因组DNA，按说明书操作。用紫外分光光度计测定DNA溶液纯度，当A260/A280值在1.6-1.8时，表