第2章_一血细胞学检验.ppt

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第2章_一血细胞学检验

第二章 一般血液学检验 主要内容 第一节?外周血液血细胞形态学检验 第二节?红细胞检验 第三节 白细胞检验 外周血细胞 由骨髓、淋巴器官造血产生,经生长发育成熟释放入外周血 红细胞 白细胞:中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞 血小板 外周血正常白细胞形态 外周血红细胞、血小板形态 血细胞生长发育成熟过程 1.造血干细胞 2.造血祖细胞 3.原始细胞 4.幼稚细胞 5.成熟细胞 血细胞生长发育成熟阶段 红细胞:原始→早幼→中幼→晚幼→网织→成熟红细胞 白细胞--中性粒细胞:原始粒细胞→中性早幼粒→中幼粒→晚幼粒→杆状核→分叶核细胞 --嗜酸、嗜碱粒细胞:原始粒细胞→嗜酸(碱)早幼粒→中幼粒→晚幼粒→嗜酸(碱)粒细胞 --淋巴细胞:原始淋巴细胞→幼稚淋巴细胞→淋巴细胞 --单核细胞:原始单核细胞→幼稚单核细胞→单核细胞 血小板:由巨核细胞产生 第一节 外周血液血细胞形态学检验 一、血细胞涂片的制作和染色 良好血涂片的质量标准 血膜距片端1/3处始,长≥25mm,两侧边距≥5mm, 由厚到薄连续均匀涂开,始端平直,末端舌状,边缘光滑, 厚薄适宜 无画线、裂隙、颗粒, 头、体、尾分清。 瑞氏染液 氯化亚甲蓝(MCl)与伊红化钠(NaE)的甲醇溶液 甲醇是Wright染料良好溶剂,固定细胞形态,将蛋白质沉淀为颗粒网状增加接触面提高染料吸附 解离成M+(亚甲蓝)和E-(伊红) 磷酸盐缓冲液(pH6.4-6.8) 瑞氏染色步骤 1.血涂片平放于染色架 2.瑞氏染液数滴覆盖血膜,固定1min 3.加等量缓冲液与染液混匀,染5-10min 4.自来水冲去染液,吸(吹)干镜检 不同化学物质的染色结果 碱性蛋白质(血红蛋白、嗜酸颗粒)与酸性伊红结合,染成粉红色 酸性蛋白质(核蛋白、淋巴胞质)与碱性美兰或天青(亚甲蓝氧化物)结合,染成紫色或蓝色 中性颗粒与伊红和亚甲蓝均结合,染成淡紫红色 血片瑞氏染色结果 红细胞呈粉红色,略有碟状感 中性粒细胞核深紫红色,胞质淡红,颗粒细小紫红色 嗜酸性粒细胞核紫红色,胞浆充满粗大橘红色颗粒 嗜碱性粒细胞核淡紫红色,胞质淡红,大小不等黑紫色颗粒 淋巴细胞核深紫红色,胞质淡蓝透明,偶见紫红色颗粒, 单核细胞核淡紫红色,胞质淡蓝或灰蓝色,细小紫红色颗粒 血小板染紫红色或蓝紫色 偏酸偏碱、时间长短,染色有差异。 染色效果的影响因素 染液浓度:浓度高,染色较深,浓度低,染色较淡 染色时间:时间长,染色较深,时间短,染色较淡或未着色 温度:温度高,细胞着色快,温度低,着色慢 pH: pH低,H+增多,细胞成分与伊红亲和力占优,染色偏红,pH高,和美兰亲和力大,染色偏蓝 细胞数量:细胞多则染液浓度略高,染色时间略长 染液浓度略低,染色时间长些,染色效果好 瑞氏染色与吉姆萨染色 瑞氏染色:细胞质成分、中性颗粒等染色效果好,细胞核染色不如吉姆萨染色效果。 吉姆萨染色:细胞核和寄生虫着色较好,胞质和中性颗粒着色较差。 复合染色取长补短。 红细胞大小异常 小红细胞:(d6μm)缺铁性贫血、铁粒幼、珠蛋白生成障碍 大红细胞:(d10μm)溶血性贫血、巨幼贫 巨红细胞:(d15μm)巨幼细胞性贫血 红细胞大小不均:巨幼贫、重度增生性贫血 红细胞染色异常 正常色素性红细胞:淡红色圆盘状,中央生理苍白区(Normal、AA) 低色素性红细胞:中央浅染区扩大(IDA) 高色素性红细胞:中央浅染区缩小或消失(巨幼贫、球形红细胞增多症) 嗜多色性红细胞:灰蓝或灰红色,胞体较大(增生性贫血-溶贫) 红细胞形态异常(一) 球形红细胞:直径略小,厚度增加,球形,无中央浅染区 (球形红细胞增多症) 镰形红细胞:细胞膜变形如镰刀状 (HbS病) 缗钱状红细胞:铜钱串样 (骨髓瘤) 棘形红细胞:表面针尖状突起,间距不规则,长宽不一 ,不同于皱缩红细胞(β-脂蛋白缺乏症) 靶形红细胞:直径增大,厚度变薄,中央、边缘深染,间苍白区,形如靶(珠蛋白生成障碍) 红细胞形态异常(二) 裂片形红细胞:碎片,有刺形、盔形、三角形、扭转形等 (DIC) 泪滴形红细胞:泪滴状或梨形 (骨纤) 新月形红细胞:残缺如新月 (疟疾) 口形红细胞:中央苍白区扁平状,有裂缝,如嘴形或鱼口 (口形红细胞增多症) 椭圆形红细胞:红细胞膜缺陷,椭圆形或杆形 (椭圆形红细胞增多症

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