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发酵工程三章工业用培养基制备
第三章工业发酵培养基及其制备 本章内容 培养基的成分 能源物质 碳源物质 氮源物质 无机盐和微量元素 前体物质 促进剂和抑制剂 水分 淀粉水解糖的制备:酸解法、酶解法、酶酸结合法 营养物质的调节 不同碳源的利用速度 氮源利用及与碳源利用的关系 碳、氮比例的调节 前体的控制 补料 培养基的类型 第一节、培养基的成分 培养基(Culture medium):选用各种营养物质,经配制成适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。 培养基的组成和配比合适与否,对微生物的生长发育、产品的产量、提炼工艺的选择和成品质量都会产生相当大的影响。 培养基的营养成分及其功能 1.碳源(Carbon source)【糖类、脂肪、有机酸】:能源物质,构成菌体和代谢产物 2.氮源(Nitrogen source)【无机氮源:氨水、硫酸铵、尿素、硝酸钠;有机氮源:豆饼粉、麦麸、玉米浆、蛋白胨;发酵菌丝体、酒糟】:构成菌体和代谢产物,硝化细菌的能源物质 3.无机盐类(Mineral nutrition)【 P、Mg、S、Fe、K、Na、Pb、Cl、Zn、Co、Mn等】:维持酶活力,调节渗透压、pH值、电位等 4.特殊生长因子【生物素、硫胺素、肌醇等】:构成辅酶的组成部分,促进生命活动 5.水:溶解营养物质和代谢产物 一、能源物质 光能自养微生物:光能 如:螺旋藻生产单细胞蛋白 化能自养微生物:氢、硫、氨、亚硝酸 盐、亚铁盐等无机物 如:细菌炼铜 异养微生物:碳水化合物、石油、天然 气及石化产品 二、碳源物质 碳源物质是培养基主要成分; 占细胞干物质的50%左右,提供能源、碳架、代谢产物。 碳源物质的易利用顺序: 葡萄糖(单)→蔗糖、麦芽糖、乳糖 (双)→糊精→淀粉 其他碳源物质: 脂类、有机酸、石油等也能作碳源。 糖蜜:蔗糖等的结晶母液,含糖50-70 %,成分丰富, 物美价廉。 淀粉水解糖的制备 糖化(Saccharify):在工业生产上将淀粉水解为葡萄糖的过程,得到的水解糖液叫淀粉糖。 糖化的原料:薯类淀粉、玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉等。 水解糖液的质量直接关系到生产菌的生长速度与代谢产物的积累,其中的低聚糖类与复合糖类等杂质越低越好。 淀粉水解糖的制备 淀粉水解糖的制备 酸解法 反应原理:淀粉——————葡萄糖 优点:设备单一、时间短(几分钟) 缺点: 对设备要求高(高温、高压、高腐蚀) 副反应多,淀粉转化率低 对原料要求高,淀粉颗粒大小均匀 淀粉乳浓度不能太高 淀粉水解糖的制备 几种水解方法的比较 从时间上看:酸解法最快,酶解法最慢 从原料转化率和糖液质量上看:酶解法酸酶法酶酸法酸解法 淀粉水解糖的制备 三、氮源物质 氮源物质是培养基的主要成分之一。 提供菌体结构物质,能源(少),含氮代谢产物。 有机氮源:豆饼粉、花生饼粉、棉子饼粉、酵 母粉、麦麸、鱼粉、玉米浆、蛋白胨、尿素等。 成分复杂,除含蛋白质、多肽、氨基酸外,还含糖、脂、无机盐、维生素及其他生长因子,对菌体生长非常有利。 无机氮源:氨水、铵盐、硝酸盐 被吸收、利用快,但成分单一,常作辅助氮源。 四、无机盐和微量元素 无机盐:酶的激活剂,生理活性物质的组成,生理活性作用的调节剂。 主要包括:P、Mg、S、Fe、K、Na、 Pb、Cl、Zn、Co、Mn等。 较低浓度对细胞的生长和产物合成有促进作用,而高浓度有抑制作用。 不同菌种、不同生长阶段需求量不同。 小试常加P、 K 、S 、 Mg、Fe 五、前体物质 前体物质(Precursor):最终所需的代谢产物的前身或其结构中的一部分。 在生物合成中直接结合到产物分子中,自身结构变化不大,能显著提高产量的小分子物质。 抗生素(Antibiotin)发酵中常用的前体物质: 五、前体物质 影响前体物质效力的因素 菌种的特性与菌龄(Cell age) 前体物质的投入量(Inoculation concentration) 前体物质的毒性(Toxicity) 六、 促进剂和抑制剂 促进剂Accelerator(刺激剂Stimulant) 并非前体
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