鉴定新生淋巴管特异性内皮标志物.docVIP

鉴定新生淋巴管特异性内皮标志物 　　【摘 要】在淋巴管新生的研究中，最后如何来确定新生的管道是否是真正的淋巴管，一方面就需要检测淋巴管内皮细胞特异性标记物的表达。淋巴管内皮细胞特异性表达Prox-1，LYVE-1，Podoplanin和VEGFR-3，并且这些受体和因子对淋巴管的新生起重要的调节作用。 　　【关键词】淋巴管；淋巴系统；特异性；标志物 　　淋巴管作为人体淋巴系统的一部分，发挥重要作用，比如，维持体内的微环境稳态，免疫反应和淋巴结转移等。临床淋巴管先天性发育障碍、手术创伤等均会导致淋巴管的缺失或阻塞，导致引流不畅，是引发肢体慢性淋巴水肿主要的原因。例如，近年来，乳腺癌的发病率正在上升，而乳腺癌根治术需要清扫腋窝淋巴结，切断了大批的淋巴管，导致并发上肢淋巴水肿的约占15%-20%[1]，轻者通过建立侧支循环而缓解，严重的则会导致上肢功能的障碍，影响他们的生活质量。??而，长期以来，国内外，主要采用烘绑绷带、手术和其他治疗方法促进淋巴回流，很难从根本上治疗淋巴水肿。其实，促进淋巴管的新生是治疗淋巴水肿的关键问题。因此，研究淋巴管新生对于治疗淋巴水肿及相关疾病具有重要意义。在研究中，最后在鉴定新生淋巴管时，需要检测淋巴管内皮细胞特异性标记物的表达，本文就对几种重要的淋巴管内皮特异性标志物进行概述。 　　1.Prox-1 　　Oliver等人于1993年在大鼠中发现同源异形盒转录因子Prox-1，主要在发育中的中枢神经系统、视网膜、晶状体、胰腺、肝脏和心脏表达[2]。1997年，Hassan等人首次从同源果蝇基因-普洛斯彼罗基因，克隆出Prox-1基因[3]。Wigle and Oliver在后来的研究中表明，鼠胚胎发育的第9.5天，在主静脉腹侧部内皮细胞的一个亚群出现Prox-1的表达； 在实施Prox-1基因敲除的鼠胚胎，发育到11.5-12.0天时，淋巴管内皮细胞停止从主静脉出芽，最终不能形成淋巴管，导致出生后不久死亡，但是，发现血管发育没有受到影响；因此，认为主静脉内皮细胞出芽及细胞向淋巴管内皮细胞转化的过程中，Prox-1的存在都是必需的，对于淋巴管的发生起关键作用[4]。Hong等人的研究发现，淋巴管内皮细胞定向分化的主要调控基因是Prox-1[5]。Petrova等人的研究表明， Prox-1之所以能诱导多种细胞的增殖，是因为能够上调细胞周期蛋白E1和E2的mRNA表达并且能激活细胞周期蛋白e启动子；微点阵分析表明，PROX-1同源盒转录因子在淋巴管内皮细胞特异性表达[6]。这些研究表明，Prox-1是淋巴管内皮细胞的特异性标志物，并在淋巴管内皮细胞的塑造和发育中起着重要的作用。 　　2.LYVE-1 　　1999年，Banerji等人发现，结构类似于CD44的LYVE-1，是一种Ⅰ型整合膜蛋白 [7]。研究发现，LYVE-1特异性表达于淋巴管内皮，在淋巴管内皮细胞的内腔面和非腔面都有表达，且在肝血窦、脾血窦的内皮细胞及激活的巨噬细胞都有表达[7，8]。Podgrabinska等人对淋巴管内皮和血管内皮进行检测，发现在蛋白和基因水平，LYVE-1都是特异性表达在淋巴管内皮细胞，而LYVE-1在淋巴管生成中的作用还不清楚[9]。Laurent 等人研究表明，LYVE-1之所以能促进淋巴管的新生，可能是通过与透明质酸结合促进淋巴管内皮细胞迁移至局部组织，这种猜想的前提是，透明质酸能调节细胞的迁移和分化，而不管是溶解的还是固定的透明质酸，LYVE-1均能结合[10]。Schledzewski等人在研究中检测恶性肿瘤和损伤修复组织的淋巴管密度时，采用LYVE-1及巨噬细胞特异性标志物的双重标记法，来区别LYVE-1+的淋巴管内皮细胞和LYVE-1+的肿瘤浸润巨噬细胞[11]。单核巨噬细胞是组织炎症修复、免疫排斥反应、恶性肿瘤淋巴转移等许多病理生理过程的重要细胞群，并且激活的巨噬细胞也会表达LYVE-1，因此，在检测淋巴管的时候，需要联合多个相关标志物进行检测。 　　3.Podoplanin 　　Podoplanin是一种跨膜糖蛋白，最早是由Wetterwald等人[12]于1996年，在淋巴管内皮及其他正常细胞发现，开始将其命名为E11抗原；后来，Breiteneder-Geleff等人[13]于1997年，在肾小球足细胞再次发现，并命名为Podoplanin。Breiteneder-Geleff 等人研究发现，Podoplanin在淋巴管内皮特异性表达[14]；另外，还在Ⅰ型肺泡上皮细胞、骨细胞、脉络丛上皮表达[12]。Schacht研究小组的研究发现，Podoplanin基因缺陷鼠在出生后，因呼吸衰竭快速死亡，这些鼠的皮肤发绀且肿胀，出现了先天性淋巴水肿；另外，他们还发现，Podoplanin能够对细胞的粘附