环金属铱配合物的细胞内pH检测及磷光寿命成像（PLIM）研究毕业论文答辩.ppt

* 配合物 Ir1 Ir2 油水分配系数 1.95 2.67 细胞对Ir2的摄取量比Ir1大，所需时间短，这与其较大的细胞毒性相对应 Ir2相较于Ir1更易进入细胞，也可能与其较大的油水分配系数有关 * Fig. 1 Intracellular localization and uptake of Ir1, Ir2 (10 μM, 12h, 37 oC ) measured by confocal microscopy . Excitation: 405 nm (Ir1, Ir2) , 633 nm (MTDR) . Emission : 670-740 nm (Ir1, Ir2), 640-660 nm (MTDR). The A549 cells were incubated with complexes and MTDR (300 nM) for 1 h Ir1、Ir2均能够进入线粒体，且Ir2的靶向性更好，共定位系数大于0.90 * pH= 4.6 pH= 5.4 pH= 6.2 pH= 7.4 pH= 8.0 100 ns 450 ns 不同pH下，配合物Ir1在A549细胞中的寿命不同，随pH值减小而增大，可以用于细胞中pH的寿命成像。 158 ns 164 ns 180 ns 210 ns 239 ns 磷光寿命τ * 设计合成了两种环金属铱(III)配合物，并用1H NMR、ESI-MS、元素分析进行表征； 配合物在PBS中具有近红外的发射波长（813 nm）和较长的磷光寿命；对于配合物Ir1，磷光发射强度和磷光寿命随pH值降低而增大； 配合物对多种细胞的毒性均小于顺铂；共定位实验表明配合物均能进入线粒体； 可以用于细胞内pH的磷光寿命成像，检测细胞内pH水平。 总结 通过PLIM技术，探究各种生理过程中的pH变化，定量检测pH水平； 通过合理设计，制备其它细胞器靶向的PLIM探针。 展望 感谢毛老师对我的悉心指导、对我留学申请上的大力推荐 感谢李毅师兄在选题、实验设计、实验技能方面的大力帮助 感谢曹老师、谭老师、黄老师以及实验室所有同学的帮助和陪伴 感谢学院提供的各类仪器设施 谢谢各位！ * 感谢聆听恳请各位批评指正！ 姓 名：鲁忻然 专 业：化学 学 号指导老师：毛宗万 教授 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 环金属铱配合物的细胞内pH检测及磷光寿命成像（PLIM）研究 姓 名：鲁忻然 专 业：化学 学 号指导老师：毛宗万 教授 * 目录 * * 铱(III)配合物优点 发射波长可调 Stokes位移大 发光量子产率高 光稳定性好 发光寿命长 理想的生物成像探针 F. Y. Li, et al. Inorg. Chem., 2006, 45, 6152. F. Y. Li, et al. Organometallics, 2010, 29, 1085. * F. Y. Li, et al. Organometallics 2007, 26, 2077. Y. Chi, et al. Polyhedron 2007, 26, 4886. Hg2+检测 Pb2+检测 F. Y. Li, et al. Inorg. Chem., 2007, 46, 11075. Hcy检测 ClO-Hg2+检测 M. Schmittel, et al. Inorg. Chem., 2013, 52, 12863 * 为何检测细胞内pH? pH在调控众多生理过程中具有关键性的作用 肿瘤组织无氧代谢旺盛，产生大量酸性代谢废物，使得肿瘤细胞的pH值低于正常细胞 方法 弱酸弱碱分布 核磁共振 微电极 荧光成像 荧光寿命成像 测定时间 长 长 短 短 短 细胞损伤 大 小 大 适中 适中 时间分辨率 适中 低 高 高 高 实时监测 × √ √ √ √ F. B. Loiselle, et al. Methods in molecular biology, 2010, 637, 311-331. * 发光寿命：发光强度降至其最大值的1/e时所需的时间 时域法基本原理 PLIM优点： 与浓度无关，只受其微环境影响； 可以定量检测； 灵敏度高、分辨率高。 M. Y. Berezin et al., Chem. Rev., 2010, 110, 2641. * 细胞内Zn2+探针 S. J. Lippard, et al. J. Am. Chem. Soc. 2011, 133, 18328 磷光寿命成像信噪比显著