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Ｃ２Ｃ１２成肌细?胞体外诱导分化为?肌管的论文 Ｃ２?Ｃ１２成肌细胞体?外诱导分化为肌管?的论文 【摘?要】 ?【目的】 观察低?浓度马血清体外诱?导成肌细胞ｃ２ｃ?１２向成熟肌细胞?分化、形成肌管的?作用，探索定向诱?导肌分化的途径及?其分子机制。【方?法】 将ｃ２ｃ１?２成肌细胞用含不?同浓度马血清的高?糖ｄｍｅｍ培养基?培养，收集细胞，?在相差显微镜下观?察形态变化，并通?过免疫细胞化学（?ｉｍｍｉｎｏｃｙ?ｔｏｃｈｅｍｉｓ?ｔｒｙ，ｉｃｃ）?及ｒｔ-ｐｃｒ方?法分别检测肌性相?关基因表达的改变?。【结果】 ? ①２０ ｍｌ／?ｌ和５０ ｍｌ／?ｌ的马血清均能促?使ｃ２ｃ１２细胞?形成肌小管，２０? ｍｌ／ｌ浓度马?血清诱导效率最好?（第７天时肌小管?形成率分别为３１?．４％ ± ２．?１％和１９．０％? ± １．６％，?ｐ ＜ ０．００?１）。 ②２?０ ｍｌ／ｌ马血?清诱导３～４ ｄ?开始有肌管形成，?之后肌管越来越多?，到８～９ ｄ达?高峰（第９天４０?．２％ ± １．?３％），往后细胞?逐渐衰老死亡。 ? ③２０ ｍｌ?／ｌ马血清诱导ｃ?２ｃ１２细胞向成?熟肌细胞分化过程?中，肌相关蛋白分?子表达发生变化：?结蛋白（ｄｅｓｍ?ｉｎ）、成肌分化?抗原（ｍｙｏｄ）?、生肌素（ｍｙｏ?ｇｅｎｉｎ）和肌?球蛋白（ｍｙｏｓ?ｉｎ）等表达逐渐?增强（未刺激时分?别约为４９．６％? ± １．１％、?２３．４％ ± ?１．１％、４．８?％ ± １．６％?和２．６％ ± ?１．５％；第６天?时分别提高为８０?．４％ ± １．?８％、８５．４％? ± １．１％、?２２．２％ ± ?１．１％和２６．?０％ ± １．６?％；ｐ ＜ ０．?００１）；ｄｅｓ?ｍｉｎ、ｍｙｏｄ?和ｍｙｏｇｅｎｉ?ｎ相应的ｍｒｎａ?分子也可以通过ｒ?ｔ-ｐｃｒ检测到?。WwW..co?M【结论】 ? ①低浓度的马血?清能够有效刺激ｃ?２ｃ１２成肌细胞?向成熟细胞分化，?以２０ ｍｌ／ｌ?浓度效果最好； ? ②ｃ２ｃ１２?细胞是研究肌细胞?发育分化的理想模?板； ③肌分?化发育??程比较复?杂，许多因素都可?能起影响，研究设?计要尽量标准化。? ? 【关键词】? ? 成肌细?胞； 肌细胞； ?肌管； 定向分化?； 基因表达 ｉ?ｎ ｖｉｔｒｏ ?ｉｎｄｕｃｅｍｅ?ｎｔ ｏｆ ｃ２?ｃ１２ ｍｙｏｂ?ｌａｓｔｓ ｉｎ?ｔｏ ｄｉｆｆｅ?ｒｅｎｔｉａｔｉ?ｏｎ ｏｆ ｍｙ?ｏｔｕｂｅｓ ｃ?ｈｅｎ ｙｏｎｇ?-ｌｅ１， ｚｈ?ｏｕ ｇｕａｎｇ?-ｑｉａｎ２， ?ｄｅｎｇ ｙｕ-?ｂｉｎ１， ｚｈ?ｉ ｗｅｉ２， ?ｘｉｅ ｈｕｉ-?ｑｉ２， ｄｅｎ?ｇ ｌｉ２， ｙ?ａｎｇ ｚｈｉ-?ｍｉｎｇ２， ｗ?ａｎｇ ｙａ-ｚ?ｈｕ１ （ １．? ｄｅｐａｒｔｍ?ｅｎｔ ｏｆ ｐ?ａｔｈｏｌｏｐｈ?ｙｓｉｏｌｏｇｙ?， ｓｕｎ ｙａ?ｔ-ｓｅｎ ｍｅ?ｄｉｃａｌ ｓｃ?ｈｏｏｌ， ｓｕ?ｎ ｙａｔ-ｓｅ?ｎ ｕｎｉｖｅｒ?ｓｉｔｙ， ｇｕ?ａｎｇｚｈｏｕ ?５１００８９， ?ｃｈｉｎａ； ２?． ｉｎｓｔｉｔ?ｕｔｅ ｏｆ ｓ?ｔｅｍ ｃｅｌｌ?ｓ ａｎｄ ｅｎ?ｇｉｎｅｅｒｉｎ?ｇ， ｈｕａｘｉ? ｈｏｓｐｉｔａ?ｌ， ｓｉｃｈｕ?ａｎ ｕｎｉｖｅ?ｒｓｉｔｙ， ｃ?ｈｅｎｇｄｕ ６?１００４１， ｃ?ｈｉｎａ ） ａ?ｂｓｔｒａｃｔ：? 【ｏｂｊｅｃｔ?ｉｖｅ】 ｔｏ ?ｏｂｓｅｒｖｅ ?ｔｈｅ ｒｏｌｅ? ｏｆ ｌｏｗ ?ｃｏｎｃｅｎｔｒ?ａｔｉｏｎ ｈｏ?ｒｓｅ ｓｅｒｕ?ｍ ｏｎ ｄｉｆ?ｆｅｒｅｎｔｉａ?ｔｉｏｎ ｉｎｄ?ｕｃｅｍｅｎｔ ?ｏｆ ｃ２ｃ１２? ｍｙｏｂｌａｓ?ｔｓ ｉｎｔｏ ?ｍａｔｕｒｅ ｍ?ｙｏｃｙｔｅｓ ?ａｎｄ ｃｏｎｓ?ｅｑｕｅｎｔ ｆ?ｏｒｍａｔｉｏｎ? ｏｆ ｍｙｏｔ?ｕｂｅｓ， ｅｘ?ｐｌｏｒｉｎｇ ?ａ ｍｅｔｈｏｄ? ｆｏｒ ｃｏｍ?ｍｉｔｔｅｄ ｍ?ｙｏｇｅｎｉｃ ?ｄｉｆｆｅｒｅｎ?ｔｉａｔｉｏｎ，? ａｎｄ ｉｔｓ? ｒｅｌａｔｅｄ? ｍｏｌｅｃｕｌ?ａｒ ｍｅｃｈａ?ｎｉｓｍｓ． 【?ｍｅｔｈｏｄｓ】? ｔｈｅ ｃ２ｃ?１２ ｍｙｏｂｌ?ａｓｔｓ ｗｅｒ?ｅ ｃｕｌｔｕｒ?ｅｄ ｉｎ ｈｉ?ｇｈ ｇｌｕｃｏ?ｓｅ-ｃｏｎｔａ?ｉｎｉｎｇ ｄｍ?ｅｍ ｃｏｍｐｌ?ｅｍｅｎｔｅｄ ?ｗｉｔｈ ｖａｒ?ｉｏｕｓ ｃｏｎ?ｃｅｎｔｒａｔｉ?ｏｎ ｈｏｒｓｅ? ｓｅｒｕｍ， ?ｔｈｅｎ ｈａｒ?ｖｅｓｔｅｄ ａ?ｎｄ ｏｂｓｅｒ?ｖｅｄ ｕｎｄｅ?ｒ ｔｈｅ ｐｈ?ａｓｅ ｃｏｎｔ?ｒａｓｔ ｍｉｃ?ｒｏｓｃｏｐｅ ?ｆｏｒ ｔｈｅ ?ａｌｔｅｒａｔｉ?ｏｎ ｏｆ