第06章 方法与试剂盒PPT.ppt

四、回收试验 分析方法正确测定加入常规分析样品中的纯分析物的能力。 目的是测定比例系统误差，以衡量候选方法的准确度。 1.方法　将被分析的纯品标准液加入样品中，成为分析样品，原样品加入同量的无分析物的溶液作基础样品，然后用试验方法分析，两者测定结果的差值为回收量。 四、回收试验 2. 回收率计算 回收率为回收量除以分析样品中纯分析物的浓度，公式如下： 　　 Tt：分析样品的测定结果 Tb：基础样品的测定结果 Tt – Tb：回收量 C：分析样品中加入的纯分析物的浓度（加入后浓度） 　　 四、回收试验 　　　式6-14 C0：加入的纯分析物的浓度 V0：加入的纯分析物的体积 TV：总体积 四、回收试验 理想的回收率为100%， 如某法测血钙的回收率为95.7%，有－4.3%的比例误差， 表明一个含钙真值为2.5mmol/L的样品，若用该方法测定，约为2.39mmol/L(＝2.5×95.7% )，误差为－0.11mmol/L(＝－2.5×4.3%)。 四、回收试验 3. 注意事项 ① 准确吸量，因为被分析物的理论值是根据加入标准液体积及原样品的体积计算所得，吸量稍有不准，就会影响结果； ② 样品中加入标准液后，总的浓度必须在方法的分析范围内，一般须加入高、中、低不同浓度做回收试验，计算平均回收率； ③ 加入标准液后，最好使试验样品的被测浓度达到医学决定水平； ④ 加入标准液的体积一般在10%以内。若稀释过大，误差将发生改变，甚至消失。 四、回收试验 五、干扰试验 1．目的要求 判断评价方法给出的结果是否受非分析物影响及影响程度， 即测定方法的恒定系统误差。 （一）方法学性能标准 （二）单值判断指标 （三）可信区间判断指标 六、临床生物化学方法学性能判断 　　性能标准（performance standards, PS）也称分析目标, 应根据不同的应用目的（筛选、诊断、预后、监测）而异。由允许分析误差（allowable analytical error，EA）和医学决定水平（medical decision level，MDL）这两项内容决定： ①允许分析误差EA：95％样品的允许误差限度； ②医学决定水平：用Xc表示，是临床判断结果具有临床意义的被分析物浓度。 六、临床生物化学方法学性能判断 （一）方法学性能标准　 EA和Xc这两项内容，就是一个测定方法的性能指标。 对于每一医学决定水平都应使用在一定Xc值下的EA值。 以血清葡萄糖测定为例： 在Xc1＝2.8mmol/L， Xc2＝6.7mmol/L，Xc3＝8.9mmol/L时，其相应的EA均为 0.56mmol/L 而在Xc4＝16.8mmol/L，相应的EA 为 1.4 mmol/L （一）方法学性能标准　 误差类别 判断指标 备注 随机误差(RE) 1.96STM＜EA STM=重复试验的标准差 比例误差(PE) （｜R-100｜）(Xc/100) ＜EA R=平均回收率 恒定误差(CE) （偏差）＜EA 由干扰试验测出 系统误差(SE) |(a+bXc）-Xc｜＜EA 对比试验回归方程 总误差(TE＝RE+SE) 1.96STM+｜(a+bXc）-Xc｜＜TEA 包括随机和系统误差 （二）单值判断指标　 95％可信区间、可信上限及可信下限 统计学表明，测定结果的可靠性与测定次数有关，次数愈多，结果反映真实性愈强。但实际上，不可能进行大量的测定。 在统计学中为了估量分析误差的不确定性，对于每一误差可计算其可信区间，用可信上限与可信下限代替单值的估量， EU为误差的可信上限，EL为误差的可信下限。 Westgard推荐95%的可信区间， EU是误差单侧的95％上限， EL是误差单侧的95％下限，用此判断候选方法的可接受性比较可靠。 （三）可信区间判断指标　 　　　　 第三节 临床生物化学检验的试剂盒 一、试剂盒的分类和特点 二、试剂盒的质量标准 三、试剂盒的制备 四、试剂盒的性能指标与评价 用于检验项目测定的含有使用说明书的所有配套试剂的组合，称为试剂盒（reagent kit，kit）。 根据方法学的不同，临床生化试剂盒可以分为化学法、酶法、免疫法。 根据其物理性状，可以分为固体试剂和液体试剂。根据其组合方法，分为单一试剂和双试剂。 正在发展的试剂盒的形式还有快速反应试剂、卡式试剂、多项同测组合试剂和浓缩试剂。 一、试剂盒的分类和特点 固体试剂包括冻干试剂、粉状试剂、干片试剂等形式 。 固体试剂的优点是运输方便、保存期长，其缺点是组份均一性较差，瓶间差较大，分装过程中的称量误差和复溶时加入水量的误差都导致瓶间的不均一性，水质的优劣对试剂的稳定性和测定结果的可靠性