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基因工程的工具- ---酶与载体PPT
转基因抗乙肝番茄(中国)
虽不能治愈乙肝,但一年吃几个,完全能代替注射乙肝疫苗。
20世纪70年代兴起的定向改造生物新技术
—基因工程
基因工程培育抗虫棉的简要过程:
上述培育抗虫棉的关键步骤是什么?
关键步骤一:
关键步骤二:
关键步骤三:
抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来
形成重组DNA分子
重组DNA导入受体(棉花)细胞
(二)基因工程的工具——酶和载体
关键步骤一的工具:
关键步骤二的工具:
关键步骤三的工具:
“分子手术刀”—限制性内切酶
“分子针线”—DNA连接酶
“分子运输车”—载体
解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具?
知识回顾
限制酶(EcoRⅠ
粘性末端:被限制酶切开的切口处伸出的,由若干特定核苷酸组成的单链(碱基可互补配对),
SmaⅠ识别GGGCCC,在G和C之间切割
平口末端 平口末端
4作用结果:
产生黏性末端(碱基互补)或平口末端
SmaⅠ限制酶
C
当堂检测
1.下列有关限制酶的描述,错误的( )
A.一种限制酶只识别一种特定脱氧苷酸序列
B.EcoRI切割的是G—A之间的磷酸二酯键
C.限制酶能识别和切割RNA
D.限制酶一般不切割自身DNA分子,只切割外源DNA
2.下列黏性未端属于同一限制酶切割而成的是
A.①② B.①③ C.①④ D.②③
B
G AATTCGGATT
CT TCATGAATTCCCTAA
GAAGTACTTAAGGGATT
CTTAA GCCTAA
生物A
载体
DNA片段
生物B
抗虫基因
DNA片段
问题:切割片段间完全拼接好了吗?
探究1若用(EcoRⅠ剪切A、B 材料片段,有几个末端?能拼接吗?
模拟---探究
重组DNA分子片段
二、“分子缝合针” —— DNA连接酶
⒈分类:
⑴ E·coli DNA连接酶
⑵ T4 DNA连接酶
⒉作用:
催化磷酸二酯键形成,连接不同DNA片段
DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗?
三“分子运输车” -基因进入受体的载体
难点突破:载体需要条件吗?
⑴有1~多个限制酶切点
⑵ 导入基因能在受体细胞中复制表达
⑶ 有某些标记基因,便于筛选
⑷ 对受体细胞无害
⒉常用运载体:
⑴细菌的质粒
⑵噬菌体或某些动植物病毒
自主学习2
阅读课本p13页第1节,完成学案
质粒:细菌和酵母菌等生物中,细胞染色体外能够自主复制很小的环状DNA分子.
完成拓展训练
1.C
2.D
3.C
高考链接1.A
2.BD
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