病理学检验ppt课件.ppt

第三节 染色前后的处理 一、染色前处理 （一）脱蜡至水 （二）脱汞盐结晶 （三）脱甲醛色素 二、染色后处理 1.分化作用 2.蓝化作用 3.染色后的脱水 4.染色后的透明 5.溶液的更换 三、封固 封固方法有 1.无水封固剂封固 2.含水封固剂封固 注意事项：1.染液应避光低温存放 2.及时清洗染色用具 3.定期过滤 4.及时更新染液 病理检验技术 12级检验（1）班01号 学号：2012130801001 姓名：蔡枝奇 第六章 组织制片技术 第一节 组织块的处理 第二节 切片机具与切片 一、取材 一、切片机 二、固定和固定液 二、切片刀 三、洗涤、脱水、透明 三、磨刀与被刀 四、浸蜡、包埋 四、切片 学 习 目 标 1.了解常用组织切片的种类 2.熟悉组织切片制作的基本程序 3.掌握常用固定液的配置和应用 4.熟练进行洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、封片等操作 第一节 组织块的处理 一、取材 定义：按照病理检查的目的和要求，切取适当大小和数量的组织块，用于制作组织切片的过程，称为取材 （一）取材的配合 病理检验技术员取材时的职责是：配合病理医师对病变组织进行肉眼检查，准确记录病理医生检查时描述的病理改变，按照病理检验的需要，选择和确定取材的部位和块数。病理检验技术人员要及时对切取的组织进行编号或标记，并在病理检单上做好记录，以便病理医生镜检时查对。取材后的标本应加足固定液，按编号存放，以备复查之用。 （二）注意事项 1.避免组织结构变形 切取组织的刀、剪应锋利，刀体宜薄，并有足够的长度。 2.组织块大小适当 通常切取的组织块厚约0.2~0.3cm，大小以1.0~1.5cm×1.0~1.5cm为宜。 3.及时取材 4.标明包埋方向 5.染色、包裹小标本 6.充分暴露病灶 取材应避免过多的坏死组织或凝血块 7.确定取材部位 8.清除多余组织 9.重复取材 10.认真核对 二、固定和固定液将组织浸入某些化学试剂，使组织细胞内所含物质尽量保持在生活状态时的形态结构和位置的过程，称为固定所使用的化学试剂称为固定液 （一）固定目的 1.防止自溶和腐败 2.凝固或沉淀细胞内物质 3.硬化组织 4.增加组织的折光率（有利于染色和观察） （二）固定方法 细胞的主要组成成分是蛋白质、脂类及糖类，应根据观察目的和诊断要求，选用相应的固定液和固定方法，使其凝固或沉淀。 常用的固定方法有以下几种： 1.浸泡固定法 2.注射、灌注固定法 3.微波固定法 4.蒸气固定法 （三）常用固定液 1.单纯固定液 是指有一种化学物质组成的固定液。此类固定液包括：重铬酸钾、苦味酸、丙酮、氯化汞、铬酸、锇酸等。 常用的有： 甲醛（福尔马林）、乙醇、乙酸（冰醋酸、醋酸) 2.混合固定液 是指由多种化学物质混合组成的固定液。实际工作上多用混合固定液，其固定效果明显优于单纯固定液。 （1）中性甲醇液 可作常规固定液或标本保存液，脂肪染色此液固定。 （2）乙醇-醋酸-甲醇液（AAF液） 其特点是固定快速，对脂质、糖类、蛋白质等物质有很好的固定作用，避免了三种固定液单独使用引起的组织收缩或膨胀，是一种优良的混合固定液。 （3）乙醇-甲醛液（AF液） 适用于皮下组织中肥大细胞的固定。 固定后的组织不必经低浓度逐级乙醇脱水，可直接移入95%乙醇脱水，也不用水洗，缩短了脱水时间。 配方： 95%或乙醇脱色 90mL 40%甲醛 10mL （4）Bouin液 是一种常规用于活检标本固定的良好固定液，适用于大多数组织的固定，尤其适用于结缔组织染色。 （5）Zenker液 适用于一般组织固定，胞核和胞质染色均清晰，对免疫球蛋白染色最好，也可用于病毒包涵体、某些肿瘤标本的固定。 （四）固定的注意事项 1.及时固定 取材后立即将组织块放入固定液中 2.固定容器宜大 3.固定液应足量 4.防止组织变形 5.确定恰当的固定时间 固定时间应依据组织块的大小、厚度以及固定液的种类、环境温度而定。组织块大小为（1.0~1.5cm）×1cm×（0.2~0.3cm）时，固定时间以12~24h为宜。 三、洗涤、脱水、透明 （一）洗涤