流感疫苗是怎样炼成的ppt课件.ppt

鸡种/品系选择（祖父母代）：适合于南方高温和潮湿环境生长的鸡种 祖父母代的鸡下的蛋，俗称种蛋，这种蛋孵出的鸡苗（父母代，也就是供我们蛋的鸡）饲养后的最佳开产时间是第25周 25周开产后产蛋率和蛋重逐渐达到最佳状态，才能符合赛诺菲对蛋重的要求。一般商品代的鸡是18周开产，但18周蛋重太轻。 孵化到11天是尿囊液发育得最多的时候，此时接种更利于病毒大量繁殖，这个天龄的尿囊血管分布清晰，接种病毒时可以避免刺破血管而出血 病毒在尿囊腔膜细胞里增殖 一只鸡一年连续下月100个鸡蛋，然后就处理掉了 * 封闭式管理不但是鸡舍的封闭（国内大部分养鸡场条件简陋，上面草棚养鸡，鸡粪直接排到下面的鱼塘养鱼，这样通过空气传播的禽致病菌很容易造成鸡群感染，如禽流感，鸡舍的封闭可以降低鸡群的生病几率）；而且是对饲养人员的封闭，饲养人员是住在养鸡场，一个月才让出去一次，外来人员也不让鸡舍参观，防止人员（人作为最大的污染源）将外来病菌带入鸡场。鸡场内人员分工是很严格的，每一栋鸡舍都是专人养殖（鸡看到陌生人会紧张，影响食欲，影响下蛋），每次进出鸡舍都要洗澡照紫外线灯消毒（法国要求），不同工作岗位的人严禁窜岗（如孵化场的人员不能进入鸡舍，不同鸡舍的工作人员不能进入他人的鸡舍）。还有很多措施都是为了biosafety以降低鸡的患病机率。 ? 温控是为了鸡群过得舒服，不能太冷也不能太热，不然影响了食欲或是得了病就会影响发育，影响下蛋了。鸡也要呼吸新鲜空气哦，所以通风是很重要的。养鸡场育有7-8只鸡，每个母鸡每周产4个左右受精蛋。 3平米养40只鸡，1.2mx2.4m，所以叫大笼，一只鸡差不多有720cm2。 鸡们经常喜欢扎堆呆，鸡笼常常会有一半是空的。一个笼36只母的，4只公的。一般的养鸡场笼子是35cmx40cm，放3-4只鸡。我们的鸡均居住面积提高了55%-100%。 ? * 我们的孵化中心生物安全的要求很高： 1．人员的控制：人员进入孵化中心前须进行沐浴更衣 2．孵化中心功能厅温度的控制：种蛋接收厅温度控制在20-25℃；熏蒸房的温度控制在25℃；蛋库温度控制在18℃ 3. 孵化中心启用前要采取相应监控措施，确保无沙门氏菌方可接收种蛋 4. 从鸡舍收集的鸡蛋在鸡舍要进行福尔马林熏蒸，送到孵化中心还要进行一次筛选（剔除脏蛋，裂纹蛋，蛋重不够的蛋），挑选合格的鸡蛋入孵前及入孵后分别还要进行一次熏蒸（消除细菌，因鸡蛋表面不能擦洗） * * 赛诺菲巴斯德在过去60多年来已经为全球提供超过14亿剂量的流感疫苗，并且在去世界150个多国家注册上市。生产出高质安全有效的产品是得益于建立了多年的稳健的生产工艺。 对于一个疫苗产品，原液生产的工艺是最为复杂的。单价流感原液的生产过程工艺6个阶段共22个步骤。每年为了准备在秋季上市的季节性流感疫苗，从春季开始整个生产历程约8个月，而其中80%的时间是为了准备单价疫苗。 而单价原液经过6个阶段：病毒培养，病毒收获，纯化，裂解，灭活和终过滤。上游的单价流感原液的生产，经过配制之后才到了流感半成品大罐。在每一个阶段，全程都严格的进行质量监控，而单价原液，半成品，分装产品和包装好的成品都有严格的QC放行检测。 * 区带离心（zonal centrifugation）主要是采用蔗糖，偶尔也用甘油或其他溶液铺梯度，因此也被称作蔗糖梯度离心（sucrose graduation centrifugation）。不同密度的分子就停留在自己的密度处，形成不同的带，因而可以分离不同的分子。离心前，离心管内先装入蔗糖、甘油、CsCl、Percoll等密度梯度介质，待分离样品铺在梯度液的顶部，离心管底部或梯度层中间，同梯度液一起离心，利用各颗粒在梯度液中沉降速度或漂浮速度的不同，使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度的梯度层内，达到彼此分离的目的。本法可分离各种细胞、病毒、染色体、脂蛋白、DNA和RNA等生物样品。 Triton自1994年就被用于流感工艺，是应用于巴斯德康纳公司Fluzone的工艺中。巴斯德以前用Tween作为裂解剂，但由于Tween较难处理，需要使用乙醚。乙醚有毒且不稳定易挥发，其次乙醚易爆，出于安全生产的考虑，乙醚的使用也应慎重。 Triton相对容易操作，风险较低，且对去除内毒素有帮助。 甲醛是液体，易溶于水，在流感生产工艺中已使用40年,工艺成熟。其较丙内酯而言容易使用；丙内酯是粉末，极度不稳定，挥发后在空气中有毒，生产过程中操作较复杂。甲醛使分子间产生共价键使分子无法再改变其空间构型,这使病毒无法感染新的细胞及复制=灭活。但化学反应需要分子间的相互作用，在未纯化的溶液中，不作为选择剂的甲醛会接触到许多除病毒外的其它分子，那么灭活的效力将降低（不能充分灭）。 * Triton自1994年就被用于流感工艺，而Twee