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动物育种学实习 李英 20110655010 胚胎移植技术 胚胎移植是胚胎生物工程的基本技术。其余胚胎生物工程技术如如胚胎分割、胚胎性别鉴定、体外受精和早期胚胎的冷冻保存等，都需要胚胎移植技术做基础。 由于附植前的早期胚胎很容易由子宫取出，且经人为处理，可以再送入子宫继续发育，故胚胎移植中的胚胎主要是早期胚胎。 一、概述 二、胚胎移植原理、操作原则和基本条件 三、胚胎移植的技术程序 一、概述 (一)胚胎移植的概念 胚胎移植（embryo transfer,ET）是直降遗传品质优良的母畜经超数排卵处理，发情后配种或人工授精，将其在其胚胎（体内产生的胚胎，一般为桑葚胚或囊胚），经过检查处理，移植到生理状态相同的同属不同种的母畜生殖道内，使胚胎继续发育直到产仔的技术。 （二）胚胎移植的概况 一、国外研究现状 　　　1890年英国剑桥大学Walter Heape首次将胚胎移植技术在兔子上实验成功到今天，已有100多年的研究历史。 20世纪30年代后，这项技术在各种家畜的应用上均获得了成功，主要有绵羊、山羊、猪、牛、马等。 60到70年代胚胎移植技术的研究和推广迅猛发展，英、美、法、西德、加拿大、日本、前苏联、中国均建立了牛胚胎移植的科研和企业机构。 1975年1月在美国科罗拉多州召开了第一届国际胚胎移植学会成立大会，进行学术交流，并规定每年召开一次交流会，这标志着胚胎移植技术进入了更高的发展阶段。 自1972年世界上第一个胚胎公司在加拿大阿尔伯达省诞生以来，发达国家胚胎工程技术研究主要由公司来承担，这一直是发达国家胚胎工程研究与开发的大趋势，数十年没有改变 二、国内研究现状 　　　我国的奶牛改良及繁育技术研究起源于19世纪60年代，从那时起我国从国外输入少量的荷斯坦奶牛（黑白花牛）与当地的母黄牛进行杂交，通过培育，形成了黑白花奶牛。此后又不断从国外引进优良种公牛与原有黑白花奶牛杂交。经过几十年的努力， 农业部在1992年将“中国黑白花奶牛”正式命名为“中国荷斯坦奶牛”。目前中国荷斯坦奶牛已成为我国人民提供所需鲜奶和奶制品的主要品种。但直到现在，中国荷斯坦奶牛的种群品质仍较差，高产奶牛种群极少。 　　　当前，国际上奶牛体外受精（IVF）胚胎产业化方面的研究和实践已经取得了突飞猛进的进展，使大规模、低成本、快速地繁殖良种奶牛成为可能。 　　　 （二）胚胎移植的原则 1.胚胎移植前后环境的同一性 这种统一性的含义是指胚胎移植后的生活环境和胚胎的发育阶段相适应，简言之为三同：同种、同期、同位。 （1）供体和受体分类学上的相同属性 （2）生理上的一致性 （3）解剖部位的一致性 2.胚胎采集的期限 理论上讲，不能超过黄体退化的时间，应在受体母畜周期黄体退化之前数日进行。通常在供体母畜发情配种后3~8d内采集胚胎。受体母畜并在相同时间接受胚胎移植。 3.胚胎移植的质量保证 在胚胎移植的全部过程中，胚胎不应受到任何不良因素（物理、化学、微生物）的影响而降低生活力。 （三）胚胎移植应具备的条件 1.胚胎的来源丰富 稳定而可靠的胚胎来源是胚胎移植的首要条件。为此，要具备优良品种的供体母畜和取得大量胚胎的方法。而后者是移植升值生产中存在的首要问题。没有丰富、稳定、可靠的胚胎来源，胚胎一直就失去了意义。目前，得到大量胚胎的常用方法是超数排卵技术，由于不同个体在不同季节对药物反应有差异，所以效果不稳定。 2.技术条件 胚胎移植技术人员需要具备一定的专业理论和技术操作水平。 三、胚胎移植的技术程序 （一）供体、受体母畜的选择 1.供体选择 （1）供体应具备遗传优势 （2）供体应具备良好的繁殖能力 （3）供体应生长良好 2.受体的选择 受体母畜可选用非优良品种的个体或土种家畜，但也应具有良好的繁殖性能和健康状态，体型中等。 在拥有大量母畜的情况下，可以选择自然发情与供体发情时间相同或相近的母畜，一般两者发情时间不宜超正负24小时。但这种状态下的受体母畜不容易找到，所以大都需要对供体和受体进行同期发情处理。 （二）受体同期发情处理 受体的同期发情处理，要和供体的超数排卵处理同时进行。依据动物种类不同，每只供体按2~12只受体准备。发情同期化的标准，在绵羊和牛，以安静接受交配的时间计算。在山羊由于其发情持续期在个体间差异很大，所以发情终止时间起算。例如：山羊无论发情持续多久，其排卵时间一般是发情终止前4~6h或在发情终止时。 小鼠的排卵同期化：可用小于超排剂量的PMSG或FSH诱导发情，然后注射HCG或LH诱导排卵。或用结扎输精管的公鼠交配，诱导其排卵。 （三）供体的超数排卵 以牛为例来进行说明： （1）FSH＋PG超排方法：在母牛发情第9~11天，早晚各一次，每次注射FSH（中科院动物所产）量为，第1天1