仪器分析课件g第7篇 章分子发光分析法.pptVIP

第7章 分子发光分析法 7-1 概述 分子吸收一定能量后，跃迁到较高能级（即激发态），在退激发时可能会有光辐射，有光辐射的现象叫分子发光。 根据分子发光建立起来的分析方法叫分子发光分析法。 上述“一定的能量”，可以是光能、化学能，分子吸收光能后发光可有两种。 荧光：光照停止，发光停止。 燐光：光照停止，发光继续。 这种现象通常叫光致发光。 分子吸收化学能而激发发光，叫化学发光。如果化学反应发生在生物体内，发生的化学发光叫生物发光。 举一些例子说明。 e.g. 日光灯——荧光灯。 Hg(g) hv 线光谱 → 卤磷酸钙（发出粉红色的荧光）+ 蓝色的汞的线光谱 → 互补成白色。 电视机屏 ----“荧屏”------实为“燐屏”-----余辉≥1/24 s（可看见动作，“视觉暂停”）。 雷达屏-----燐屏。 萤火虫-----生物发光，能量转化几乎100% (生化能→光能)。 分子发光分析法的用途：一般用作有机物测定，有简易便宜的仪器。 e.g. 可测定氨基酸、维生素、农药残留、3.4苯并芘、黄曲霉素----。 也可测定微量金属离子：Zn、Mn、Cu、Fe、Mg、Mo、B、Se、Ge等。 灵敏度高，一般可达ppb级。 本章主要介绍荧光分析法。 VR：振动弛豫，碰撞变成热。 ISC：系间窜越。 IC：内部转换。 3、荧光和燐光的产生 荧光：分子从S1态的最低振动能级跃迁到S0态的各个振动能级产生辐射去激。需时不长，约10-9—10-6秒，叫快速荧光。 即 S1(min) → S0 (all) 由于IC(内部转换)的存在，荧光的能量比激发光低，荧光光谱的峰值波长比激发光峰值的长，即产生红移。这种现象叫Stokes位移。 e.g. 叶绿素的吸收光谱 660 nm， 叶绿素的荧光光谱 667 nm。 三重态T1的寿命比较长,在光照停止后仍可发光----燐光。 若T1----s1----so，则产生延迟荧光或慢速荧光。 二、荧光激发光谱和荧光发射光谱（自看） 三、荧光量子产率 ：吸收的光子数（光强）有多少转变成荧光。定义是 1、对非荧光物质 2、对荧光物质 e.g. 硫酸奎宁 色氨酸 四、荧光分析的定量依据 根据朗伯—比尔定律