紫草素对D-半乳糖损伤老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力影响.docVIP

紫草素对D-半乳糖损伤老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力影响 　　【摘要】 目的 探讨新疆软紫草有效成分紫草素对D半乳糖所致老年性痴呆模型大鼠学习记忆功能的影响。方法 雄性Wistar大鼠腹腔注射D半乳糖生理盐水(150 mg/kg#8226;d)连续6周,继以紫草素高(0.7 mg/100 g#8226;d)、低(0.35 mg/100 g#8226;d)剂量灌胃给药1周。以Morris水迷宫测定大鼠空间学习记忆能力、以黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别测定大鼠脑匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力及丙二醛(maleic dialdehyde, MDA)含量。结果 与对照组相比,模型组的学习记忆能力和SOD活力明显降低、MDA含量明显升高(P 　　【关键词】 紫草素;D-半乳糖;老年性痴呆模型 　　 　　老年性痴呆(AD)是一种严重危害老年人群身心健康的慢性神经退行性疾病,其发生机制与自由基过载造成的氧化应激反应密切相关,后者可引起痴呆模型动物脑内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量??高、超氧化物歧化酶(SOD)水平降低,是AD发生的重要影响因素。新疆软紫草有效成分紫草素具有体外抗氧化及抗衰老等多种药理活性,对氧化应激损伤具有较好的拮抗作用,但其是否具有脑内抗氧化及改善AD患者学习记忆的作用尚未见明确报道。本研究采用AD大鼠模型,通过观察其脑内MDA和SOD含量的变化,初步探讨紫草素对AD的防治作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物及分组 30只雄性Wistar大鼠,体质量230~270 g,购自新疆实验动物中心,合格证号XJLA-2008-04。动物 　　? 　　基金项目:石河子大学高层次人才科研基金项目(项目编号:RCZX200664) 　　作者单位:721000宝鸡市人民医院(景富春);石河子大学药学院药本05级1班(高建波 刘冬);石河子大学药学院药理系(许玉华 王振华); 石河子大学药学院中药系(谭勇) 　　 　　被随机分为对照组、模型组、阳性药组、紫草素高剂量组和紫草素低剂量组, 5只/组。 　　1.2 药物和试剂 D-半乳糖(批号080120)和考马斯亮蓝G250购自上海蓝季公司、超氧化物歧化酶(SOD,批及丙二醛(MDA,批试剂盒为南京建成生物工程研究所提供,软紫草有效成分紫草素购自中国生物制品检定所,其他试剂均为国产分析纯,水为超纯水。 　　1.3 仪器 Thermo 多功能酶标仪,Morris水迷宫(中国医学科学院药物研究所),德国IAK-R104组织匀浆机,湖南凯达TGL20M高速冷冻离心机。 　　1.4 造模及给药方法 模型组、阳性药组、紫草素高剂量组和紫草素低剂量组大鼠均腹腔注射D-半乳糖300 mg/(kg#8226;d),对照组同样方法注射0.9%氯化钠注射液2 ml/(kg#8226;d),连续6周。于第6周末次给药结束后开始进行水迷宫实验,将筛选合格动物纳入后续实验,水迷宫试验方法参照文献[1]。其中,阳性药组给予灌胃给药哈伯因0.008 mg/100(g#8226;d),紫草素高剂量组和低剂量组分别灌胃给药紫草素0.7 mg 和0.35 mg/100 g#8226;d,连续1周。对照组及模型组灌胃给药等容积生理盐水。给药结束后先行水迷宫实验,然后进行脑匀浆SOD和MDA测定。 　　1.5 脑匀浆SOD和MDA含量测定 对照组、模型组、阳性药组、紫草素高剂量组和低剂量组均于末次给药后迅速置0℃冰面断头处死,冰浴下快速匀浆,继以低温高速离心,设定速度3000 r/min,离心时间10 min。取上清液备用。SOD和MDA试剂的配制均参照试剂盒相应说明书。脑匀浆中蛋白含量测定用考马斯亮蓝G250法。 　　1.6 统计学方法 所获数据均采用x±s表示,用SPSS for Windows 10.0统计软件作单因素方差分析(ANOVA),以P 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 　　研究表明,AD的发生与多种因素导致脑内学习记忆相关神经元损伤有关[2],其中氧化胁迫反应是主要病理改变之一。氧化胁迫可引起痴呆模型动物脑组织胆碱能神经和多巴胺能神经功能受损,胆碱乙酰化酶活性降低,单胺氧化酶活性(MAO-B)升高,造成脑内与学习记忆和认知功能相关的神经递质乙酰胆碱(ACh)及多巴胺等的水平降低。还可导致衰老神经元胞浆中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量明显增高,后者呈帽状结构围绕脂褐素沉积,并成为老年斑的组成部分。氧化胁迫尚能造成其顶下小叶中表达超氧化物歧化酶(SOD)及在海马中表达谷光甘肽(GSH)的mRNA基因转录