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工业发酵染菌防止
第十章 工业发酵染菌 的防止和灭菌 江苏大学食品与生物工程学院 张志才 E.Mail: zhangzhicai2001@ 一、染菌的危害 二、杂菌污染的原因与防治 三、噬菌体污染的防止 绝大多数工业发酵,无论是单菌发酵还是混合菌种发酵,都是纯种发酵,除菌种以外的微生物都被视为杂菌。所谓染菌,是指在发酵培养基中侵入了有碍生产的其它微生物。几乎所有的发酵工业都有可能遭受杂菌或噬菌体的污染。 一、染菌的危害: 对发酵本身的影响:轻者影响产量或质量,重者可能导致倒罐,甚至停产,造成原料、人力和设备力的浪费。因此,防止杂菌和噬菌体污染是保证发酵正常进行的关键之一。 对产物提取和产品质量的影响 (1)对过滤的影响 发酵液的粘度加大;菌体大多自溶;由于发酵不彻底,基质的残留浓度加度。造成过滤时间拉长,影响设备的周转使用,破坏生产平衡;大幅度降低过滤收率。 (2),对提取的影响 1)有机溶剂萃取工艺:染菌的发酵液含有更多的水溶性蛋白质,易发生乳化,使水相和溶剂相难以分开 2)离子交换工艺:杂菌易粘附在离子交换树脂表面或被离子交换树脂吸附,大大降低离子交换树脂的交换量 (3),对产品质量的影响 1)对内在质量的影响:染菌的发酵液含有较多的蛋白质和其它杂质。对产品的纯度有较大影响。 2)对产品外观的影响:一些染菌的发酵液经处理过滤后得到澄清的发酵液,放置后会出现混浊,影响产品的外观。 (4)、染菌对三废处理的影响 使过滤后的废菌体无法利用,发酵染菌的废液,生物需氧量(BOD)增高,增加三废治理费用和时间。 染菌对三废处理的影响 使过滤后的废菌体无法利用,发酵染菌的废液,生物需氧量(BOD)增高,增加三废治理费用和时间。 防重于治,事前防止胜于事后挽救。即使在发酵后期染菌,对产量无显著影响,也对提取不利,会降低产品质量及收率。 染菌原因:菌种、空气、设备、原料等。除了需要采取措施确保菌种本身的纯度、不使接种物带入杂菌外,深层发酵中必需认真做好培养基及有关发酵设备的灭菌、空气除菌、无菌操作等工作,以确保发酵的顺利进行。 一、 杂菌污染的原因与防治 从染菌的现象分析染菌原因: (1)从染菌时间来看,早期染菌(如接种后12h或24h),除了种子带菌外,主要是培养基或设备灭菌不彻底。相反,中、后期染菌则可能与中间补料、设备渗漏以及操作不合理等有关,也可能是空气过滤器不严所致。 (2)从污染的杂菌类型看,污染耐热的芽孢杆菌,多数是因培养基灭菌不彻底或设备存在死角所致。污染无芽孢杆菌、球菌等不耐热菌,可能是从蒸气的冷却水中带来的,空气系统密封不严造成。感染浅绿色菌落(G-杆菌、球菌),来源是水,可熊是设备渗漏或冷却器穿孔。感染霉菌、酵母,一般是由于灭菌不彻底或无菌操作不严造成的。 (3)大面积发酵罐染菌是指整个工厂各个产品的发酸罐都出现杂菌现象,而且染的是同一种菌,主要是空气过滤器除菌不净,空气带菌而造成。 (4)部分发酵罐(或罐组)杂菌,例如生产同—产品的几个发酸罐都染菌,如果染菌出现在早期,可能是种子带杂菌;出现在中后期,则可能是补料或空气带菌所致。在使用连消的设备中,如果用连消进料的发酵罐都出现染菌,则可能是连消系统灭菌不彻底而引起的。 (5)个别发酵罐连续染菌,较多地是由于设备问题而造成的。如阀门的渗漏或罐体被损,特别是蛇形管的穿孔,有时不易察觉。有时设备破损引起的染菌会出现每批染菌时间前移现象。 (6)个别发酵罐偶然染菌的原因最为复杂,各种染菌途径都有可能引起。 防治染菌要点: (1)空气系统 防止空气带菌主要是提高空压机进口空气的洁净度、防止空气带油、水及过滤器失效。如提高空压机吸气口位置并加强压缩前的过滤,防止空气冷却器漏水顶进入空气系统;在空气过滤器灭菌时要防止冲翻介质而短路,防止考焦介质或着火;当突然停止进空气时,要防止发酵液倒流入过滤器内;装填纤维介质时要压紧;操作中要防止空气的压力剧变和流速激增等。 (2)蒸汽 重视饱和蒸汽的质量,严防蒸汽中夹带大量冷凝水,防止蒸汽压力大幅度波动,保证生产用汽压在0.3~0.35MPa以上。 (3)设备 a.连消设备的连消塔要简单,易拆装清理,操作时蒸汽能与物料均匀混合,并易控温度;维持罐在料液输送时培养基在罐中能均匀地缓慢上升,不走短路。 b.发酵罐及其附属设备应注意严密和防止泄漏,避兔形成“死角”。与物料、空气、下水道连接的阀门皆需保证严密度。 c .用超净工作台及净化室代替无菌室,以提高无菌程度。 (4)工艺操作 a.空罐准备 放罐后应进行全面检查和清洗。要清理罐内残渣,去除罐壁污垢,清除空气分布管、温度计套管等处堆积的污垢及罐内的“死角”。要防止端面轴封漏气、搅拌填科箱及阀门渗漏等。蛇管和夹层要按设计规定的压力定期试压。空消时
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