硕士论文-食用菌病毒的研究.docVIP

摘要 香菇具独特香味且有多种保健功能，是我国栽培的主要食用真菌之一。但近些年我国大陆部分产区出现了不同程度的香菇病毒病，使香菇的产量和质量受到明显影响，重者绝收，损失严重。本实验结合dsRNA方法和酶法对福建农林大学菌物研究中心收集自不同地方的8个疑似病毒病香菇菌株和61株表现正常的香菇菌株进行dsRNA因子检测。最后发现：采自不同地方的8个疑似病毒病香菇菌株均含有相同大小的dsRNA条带，即：11kb、1.6kb、0.9kb；而61株表现正常的菌株中70%都含有大小数量不同的dsRNA条带，且含有dsRNA条带的菌株中大都有11kb这条带。 dsRNA是RNA病毒复制的中间产物，dsRNA的大小对应于RNA病毒的基因组，而正常食用菌体内不含有dsRNA， dsRNA的存在在某种程度上反映了体内病毒的存在，因此可以通过提取dsRNA对该类病毒进行检测等方面研究。 通过本试验我们看出dsRNA在香菇中是相对普遍存在的，但它究竟是在香菇的生长发育中起什么作用？考虑到dsRNA的普遍发生及其不明的生物学作用和香菇的经济价值的日益增长，必须提出一种旨在发展无dsRNA的育种用菌株究方案，只有获得了含有dsRNA和不含有dsRNA的同基因菌株，以上的问题才有可能得到解决。因此接下来选取三个疑似病毒病菌株采用挑取菌丝尖端（长度小于0.2mm）的方法进行脱毒。经脱毒后我们发现1.6kb和0.9kb的条带容易被脱除，三个菌种脱毒后都能得到只含11kb一条带的菌株，然而只有一个菌种得到了一株无dsRNA的菌株。我们接下来对脱毒不彻底菌株、彻底脱毒菌株和带毒菌株做了酶活、不同条件下的生物学特性研究。结果发现彻底脱毒菌株和脱毒不彻底菌株在抗逆性方面和酶活明显优于带毒菌株。 关键词：香菇病毒 dsRNA技术 尖端脱毒 酶活 生物学特性 Abstract With special aroma and many kinds of health care functions,lentinula endodos is one of main cultivated mushroom in China.while in recent years,various degrees of virus disease were detected in Mainland Lentinula edodes,causing severe influences in yield and quality In this experiences ,sixty-eight Lentinula edodes Strains,including eight suspected of virus disease and sixty-one normal strains,collected in mycological research center of Fujian Agriculture and Forest university were detected by gel electrophoresis patterns and enzyme method..finally we found they all have the same number and size bands in eight suspected of virus disease strains,that is 11kb,1.6kb,0.9kb in size.seventy percent of normal strains have various size and number bands,most containing the band in11kb size. Double stranded RNA(dsRNA) occurs during the replication of mushroom virus.these dsRNAs are corresponding to genome of viruses and subviral agents .consequently infected tissues contain virus-specific dsRNAs.since healthy mushroom produces no dsRNA,purification of dsRNA is useful for virus diagnosis. Through the experiences we draw the conclusion that dsRNA in Lentinula edodes is widely existed. But what function does it hav