生物化学实验技术培训讲解.pptVIP

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生物化学实验技术培训讲解.ppt

实验一 生物化学实验原理和方法 Principles and Methods of Biochemical Experiment ;一.实验内容;二.实验步骤;2.如何进行实验记录和写好实验报告;实验报告:;手工画图一定使用 坐标纸,铅笔,字迹工整.;考核与考试 实验素质(遵守实验室规则和道德行为)(10%) 实验预习情况(10%) 实验操作情况实验报告情况(80%) 实验成绩:为各项实验成绩总和的平均值。 主要参考资料 现代生物学基础实验指导 林宏辉等,四川大学出版社,2003 生物化学实验原理和方法 李建武等编 北京大学出版社 1994年 生物化学实验 陈钧辉等编 3版或4版 科学出版社2003 ;3.常用玻璃仪器的洗涤及使用 玻璃仪器的洗涤, 移液管(pipette),移液枪, 容量瓶(volumetric flask ), 滴定管(burette)的使用, 过滤(filter) 匀浆器(homogenizer)等;玻璃仪器的洗涤及干燥 意义:去除干扰物,提高实验结果的准确性。;干燥方法 1、 晾干:仪器倒立放在特制架子上,自然晾干。 2、 烘干:尽量倒净仪器内部的水,将其倒立放在托盘上,放入烘箱烘干。普通仪器用80-100℃,容量分析仪器用37-40℃。 3、 有机溶剂干燥:体积小的容器急需干燥时,可用此法。洗净的仪器先用少量酒精洗一次,再用少量丙酮或乙醚洗涤,吹干(不必加热)。;液体体积的度量仪器及使用方法;使用前: ① 观察吸管有无破损,污渍。 ②观察吸管的规格:所用吸管的规格应等于或近似等于所要吸取的溶液的体积。 ③观察有无“吹”字:若有,说明刻度到尖端,放液后需将尖端的溶液吹出,否则不吹。 握法:用右手的拇指和中指拿住管颈标线以上部位,拇指和中指夹拄吸管,食指游离。下部的尖嘴插入待移取的液体中.左手拿洗耳球. ;取液: ①垂直入液 ②入液深度适中 ③洗耳球吸取 ④取液高度高于刻度2-3cm ⑤食指按紧吸管上端 ⑥刻度吸管提离液面 ⑦观察液内无气泡 ⑧滤纸擦净管壁。 ;移液枪的使用;;移液的方法 ????? 吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。 用大拇指将按钮按下至第???停点,然后慢慢松开按钮回原点。吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。 接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按 按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。 ;移液器的正确放置 使用完毕,可将其竖直挂在移液枪架上,但要小心别掉下来。 当移液器枪头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。 如不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。 移液器未装吸头时,切莫移液。 移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如浓酸、浓碱、有机物等)。 严禁使用移液器吹打混匀液体。 ;容量瓶 ;滴定管;开始滴定时,液体滴出可快一些,但应成滴而 不成流。 溶液出现瞬间颜色变化,随着瓶子的摇动很快消失。 当接近终点时,颜色变化消失较慢,这时应逐滴滴入溶液,摇匀后由溶液颜色变化再决定是否滴加溶 液。 最后控制液滴悬而不落,用锥形瓶内壁将溶液沾下(相当于半滴),用洗瓶冲洗锥形瓶内壁,摇匀,如颜色变化不再消失,即为终点。 读数时,视线在弯月面下缘最低点处,且与液面成水平 ;过滤 ;三接触: ①过滤时要使盛有待过滤液体的烧杯的烧杯嘴与倾斜的玻璃棒相接触。 ②是玻璃棒的下端要与滤纸为三层的那一边相接触。 ③是漏斗的颈部要与接收滤液的接受器的内壁相接触。 ;匀浆器 ;4.常用仪器的使用;天平的使用;操作电子天平的主要步骤 (1)接通电源并预热使天平处于备用状态。 (2)打开天平开关(按操纵杆或开关键),使天平处于零位,否则按去皮键。 (3)放上器皿,读取数值并记录,用手按去皮键清零,使天平重新显示为零。 (4)在器皿内加人样品至显示所需重量时为止,记录读数. (5)将器皿连同样品一起拿出。 (6)按天平去皮键清零,以备再用。 ;离心机;5、?根据需要依次设置离心所需要的温度、运行程序(可不选择)、转速、离心时间(当触及某一项的按键时,显示屏上相对应的值会闪烁,设完一个参数可直接触及下一个按键,继续设定所需数值),设置结束后按“start/stop”开始运行机器。 6、?离心结束后,转子会逐渐地停下来,“open”键指示灯亮起,按此键打开离心室,旋开转子盖,取出样品。 7、?将离心管处理干净,倒置在小张滤纸上使其干燥,以便下次使用。旋上转子盖,关上机盖。若离心室内壁有冰霜待其

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