alln upfⅱ单用及联用对去血清饥饿诱导大鼠骨骼肌细胞凋亡降解的影响及机制word格式论文.docxVIP

下载本文档

6
0
约3.85万字
约 45页
2018-05-18 发布于上海
举报
版权申诉

alln upfⅱ单用及联用对去血清饥饿诱导大鼠骨骼肌细胞凋亡降解的影响及机制word格式论文.docx

1、有哪些信誉好的足球投注网站（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

alln upfⅱ单用及联用对去血清饥饿诱导大鼠骨骼肌细胞凋亡降解的影响及机制word格式论文

目录目录........................................................................................................................2中文摘要……………………………………………………………………........3 英文摘要……………………………………………………………………........4 英文缩略语表…………………........................................………………………6 引言………………………………………………………………………............7 材料和方法…………………………………………………………….......…….10 结果………………………………………………………………..............……..17 讨论……………………………………………………………………......……..22 结论………………………......…………………………………………………..29 参考文献……………………………….......…………………………………….30 致谢………………………………………………………………………........…35 综述........................................................................................................................36本课题来源于基金项目：国家自然科学基金编号：812724652ALLN、UPFⅡ单用及联用对去血清饥饿诱导大鼠骨骼肌细胞凋亡降解的影响及机制中文摘要目的:探讨钙蛋白酶抑制剂ALLN（N-acetyl-Leu-Leu-Norleucinal）与外源性泛素-蛋白酶体片段Ⅱ（Ubiquitin/Proteasome FractionⅡ, UPFⅡ）单用及联用对去血清饥饿大鼠骨骼肌细胞凋亡降解的影响及其可能机制。方法:离体培养3-5日龄SD大鼠骨骼肌卫星细胞，倒置显微镜下适时观察、拍照、记录骨骼肌细胞的生长状态；采用HE染色以及骨骼肌肌动蛋白单克隆抗体(α-sarcometricactin)免疫荧光方法鉴定骨骼肌细胞，待细胞培养成熟稳定后调整浓度，随机分为5组：（1）A组(完全培养基对照组)，（2）去血清饥饿系列：B组(单纯基础培养基对照组)、C组(基础培养基+UPFⅡ组)、D组(基础培养基+UPFⅡ+ALLN组)、E组(基础培养基+ALLN组)；采用噻唑蓝（MTT）法测定各组细胞在药物干预72h后的生存率，采用适时荧光定量PCR 法检测各组细胞在药物干预72h后Calpain-3、MuRF-1、Atrogin-1在mRNA水平的表达情况。结果:1.MTT结果分析显示：与完全培养基A组比较，去血清饥饿B、C、D、E组细胞生存率分别为（57.89%±5.07%）、（41.22%±4.87%）、(56.94%±6.02%)69.72%±6.25%），各组生存率均下降（P0.05)；E组细胞生存率较B、C、D组均高（P0.05）；D组生存率较C组高（P0.05）；B组与D组之间无明显差异（P0.05）。2.实时荧光定量PCR结果显示：与A组比较，去血清饥饿B、C、D、E组细胞 Calpain-3、MuRF-1、Atrogin-1的mRNA表达量分别为23.71±0.10/23.18±0.08/22.22±0.10倍、24.52±0.07/24.10±0.07/23.29±0.05倍、23.78±0.07/ 23.11±0.05/22.15±0.07倍、22.60±0.04/22.37±0.10/21.65±0.08倍，差异性均显（P0.05）；E组细胞各基因表达量较B、C、D组均明显降低（P0.05）；D组细胞各基因表达量较C组均明显降低（P0.05）；B组与D组之间无明显差异（P0.05）。结论:适量钙蛋白酶抑制剂ALLN能有效抑制外源性泛素-蛋白酶体UPFⅡ对骨骼肌细胞凋亡降解的促进作用；在骨骼肌细胞的凋亡降解过程中，泛素-蛋白酶体系统可能要受到钙蛋白酶体系统的先导性控制。关键词:钙蛋白酶抑制剂、泛素-蛋白酶体、骨骼肌细胞、原代培养、细胞凋亡3Theapoptosis,degradationeffectsandpossiblemechanismsofALLN,UPFⅡaloneandcombinationapplyinginratskeletalmusclecellsofserumstarvationAbstractObjective：Tostudytheapoptosis,degr