艾滋病感染的试验室诊断.PPT

HIV实验室的质量控制及 规范化管理 吉林省疾病预防控制中心 臧希卉 艾滋病实验室质量管理 实验室质量管理包括质量保证、质量控制和质量评价。 一、质量保证( QA） 质量保证是指从接收样本起，到实验室发出报告止，为确保实验室最终报告结果的正确性所进行的全过程，包括采取各种行政和技术上的措施和方法。 行政支持（行政部门关心实验室发展、建设，人员稳定，足够经费） 人员培训 （新人员上岗前培训获得合格证书，接受复训，筛查实验室人员至少2年一次。检测人员应分为检验人、复核人、签发人。复核人和签发人应具备对检测过程进行分析和解决问题的能力） 环境条件（实验室设置、建筑、设备符合要求） 标本采集、运送和处理 检测方法和试剂的选择 设备维护与校准 （酶标仪、洗板机、移液器校准，冰箱、孵箱及其他仪器定期检查） 文件和文件管理 检测方法和试剂的选择 使用经国家食品药品监督管理局注册批准的试剂，选择敏感性高，特异性好的，根据参比室组织的国家级艾滋病诊断试剂临床质量评价 各实验室更换试剂批号时，应进行平行试验 所有试剂盒要严格按照要求条件保存，试剂盒拆封时要记录拆封时间。 设备维护与校准 目前常用的艾滋病检测设备类 安全类：生物安全柜、洗眼器、普通冰箱、超低温冰箱、自动高压消毒柜 检测类：微量加样器、摇摆平台、全自动蛋白印迹仪、普通离心机、震荡器、移液器、 恒温水浴、酶标仪+洗板机、病毒载量仪、流式细胞仪 其它：计算机、空调 规范化管理的意义 遵照《全国艾滋病检测工作规范》 检测质量保证 延长设备的使用时间 便于设备的管理 节约资源 HIV实验室的设备维护 日常维护 定期检定和校准 设备对环境的普通要求 电源：电压一定要匹配，插线板合适，专用的.经常停电或电压不稳的实验室，建议配备稳压器和不间断电源 环境：清洁，温、湿度合适 良好通风 长时间不用的设备，注意特别容易坏 酶标仪 （1）ELISA 洗板机与酶标仪 ： 每天：每次操作要按要求设立对照。核对酶标仪滤光片波长，检查洗板机管道是否通畅，是否有漏液现象。 每月：洗涤时检查各孔是否与相应的冲洗头对位良好，负压是否符合规定要求，这是保证各孔洗涤均衡一致的前提。 每年：检查、清洗滤光片，如果滤光片出现破裂或霉点则要更换，根据仪器内具有的校准程序或使用校准板，对滤光片的所用波长光密度的精密度进行校验， 测定20次，计算精密度。精密度应该控制在厂家说明书中所规定的范围 ( 建议请厂方代表校验 )。校验结果要有记录，保留测定原始结果。 根据实际使用情况更换主要设备内的所有液体装置和管子(要求厂方代表维修 )。 移液器的校准 一年至少校准一次 需校准的原因 -经常使用 -要求高的准确性 -要高压灭菌 -用于移高粘稠性、高密度溶液 -温度变化大 移液器: 用蒸馏水称量标定移液器方法(参考芬兰Labsystems移液器标定方案) 在一室温为22 ℃的小型工作室(无风)中，在万分之一级别天平上放置一个小三角烧瓶，用待标定的移液器吸取蒸馏水( 隔夜存放 )加入小三角烧瓶内底部，每次称重后计量，去皮重后再加蒸馏水，连续加蒸馏水10次。加蒸馏水的量根据待标定的移液器不同规格而不同，见下表。移液器标定合格后，在移液器上贴上合格标签，标明日期。在移液器标定记录中填写移液器规格、编码、10次标定称量、标定日期和标定人签名。移液器10次标定称量在所要求的重量范围内为合格移液器；不合格移液器要根据移液器生产厂家所推荐的方法进行校准。 超低温冰箱 定期清理灰尘过滤器（建议每月一次） 超低温冰箱注意事项 要求环境温度控制在28度以下 空间的清洁 稳定的电源供应 不宜放得太挤 生物安全柜 HEPA-过滤装置容纳有害生物气体。 需提供人员保护 也为产品提供保护 (按等级而定) 生物安全柜的维护 每年检定一次安全柜 保持所有操作在窗扇4英寸以内 清洁物质和污染物隔离开，减少相互干扰 使用后及时清理 堵窗扇 柜内不宜放太多的物品，不能储藏化学物质