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解除基质过浓的抑制 解除产物的反馈抑制 解除葡萄糖分解代谢阻遏效应 补料控制目的 补充微生物能源和碳源的需要。 补充菌体所需要的氮源。 补充微量元素或无机盐。 补料的内容 控制微生物的中间代谢,使之向着有利于产物 积累的方向发展。 为实现这一目标,在中间补料控制时,必须选 择恰当的反馈控制参数和补料速率。 补料的原则 ? 大多数补料分批发酵均补加生长限制性基质 – 以经验数据或预测数据控制流加; – 以pH、尾气、溶氧、产物浓度等参数间接控制 流加; – 以物料平衡方程,通过传感器在线测定的一些 参数计算限制性基质的浓度,间接控制流加; – 用传感器直接测定限制性基质的浓度,直接控 制流加。 补料控制的策略 ? 为了有效地进行中间补料,必须选择恰当的反馈控制 参数,以及了解这些参数与微生物代谢、菌体生长、 基质利用以及产物形成之间的关系。采用最优的补科 程序也是依赖于比生长曲线形态、产物生成速率及发 酵的初始条件等情况。因此,欲建立分批补料培养的 数学模型及选择最佳控制程序都必须充分了解微生物 在发酵过程中的代谢规律及对环境条件的要求。 补料控制参数的选择 ? 例如,在谷氨酸发酵过程中的某阶段,生产菌的 摄氧率和基质消耗速率之间存在着线性关系。 连续补料和分批补料发酵的比较 OUR QsX 耗氧量 ( mmlO 2 ) 糖耗 ( mmol ) = K = 补料速率的确定 ? 优化补料速率也是补料控制中十分重要的一环,因为养分和 前体需要维持适当的浓度,而它们则以不同的速率被消耗, 所以补料速率要根据微生物对营养等的消耗速率及所设定的 培养液中最低维持浓度而定。 ? 例如,用连续培养方法测定了在不同比生长速率下青霉素生 产菌产黄青霉的碳、氯、氧、磷、硫和乙酸盐及菌最适生长 所需的各种基质的补料速率。 ? 发酵工业中,由于使用微生物不同,其代谢规律不一 样,因而有的是需氧发酵,有的是厌氧发酵,也称静置 培养。例如:酒精、啤酒、丙酮、丁酵及乳酸等均是属 于厌气发酵产品,其发酵设备因不需供氧,所以设备和 工艺都较好氧发酵简单。 – 固态发酵(如白酒); – 液态发酵(如酒精、丙酮、丁醇、乳酸、啤酒)。 厌氧发酵工艺要求与控制 ? 固态发酵主要是一些传统发酵工艺。例如生产大曲酒、 麸曲酒就是典型的固态发酵。固态发酵中无菌要求不 高,整个生产过程都是敞口操作。除原料蒸煮过程能起 到灭菌作用外,空气、水、工具和场所,窖池等都存在 大量的多种多样的微生物,并把这些微生物带到发酵原 料中,它们与曲中的微生物一起协同作用,生产出丰富 的香味物质,因此固体厌气发酵是多菌种的混合发酵。 ? 发酵过程中,一般都采用比较低的温度,糖化作用和发 酵作用同时进行;即采用边糖化边发酵的工艺。当采用 20~30℃低温时,糖化酶作用缓慢,故糖化时间要延长。 固态发酵 ? 固态发酵的温度控制靠控制进窖温度和淀粉含量来解 决。因在窖内部没有冷却或加热装置,这样只好把进 窖温度控制得比较低(18~22℃)。糖化进行缓慢,发酵 也就缓慢,窖内升温慢些,酵母就不易衰老,发酵率 就升高。进窖时原料淀粉含量不能太高,在发酵过程 中一部分能量被放出,升高了发酵温度,一般发酵过 程中,淀粉含量降低1.0%时,酒醅温度实际约上升 2℃左右。所以淀粉含量控制在1 4~l 6%,随气温的高 低不同进行适当地调整。 固态发酵的温度控制 ? 一般工厂用酸度表示。酸度来自原料本身,曲 和酒醅是最主要的。在发酵过程中酸度增加的 原因,主要是杂菌的影响,淀粉浓度过高,糖 化快,细菌生长繁殖快,造成酒醅酸度升高, 也反过来影响酵母生长,影响发酵,酸度低又 影响糖化速度。因此控制酸度既适宜酵母生长 又抑制细菌生长。一般控制在1.4~2.0的酸度。 固体发酵的pH控制 ? 固体发酵中水份是微生物生长的条件,适当的水分是 良好发酵的重要因素。但入窖水分过高,会引起糖化 和发酵作用加快,升温过猛,使发酵不彻底;而水分 过少,会引起酒醅发干,残余淀粉高,酸度过低,槽 不柔软,影响发酵正常进行;一般大曲酒入窖水分为 53~57%,小曲57~62%,因原料而异,冬天与夏天也 不同。另一方面为了调整淀粉浓度,增加疏松性,调 节酸度,以利于微生物的生长繁殖,保持水在固态发 酵时常常加入填充料、如谷壳等。 水分的控制 ? 厌气发酵在液体状态下进行,液体发酵速度快, 发酵完全,发酵周期短,原料利用率高,而且适 于大规模机械化、连续化、自动化生产。 ? 液态厌气发酵对无菌要求较高,
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