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电子顺磁共振 电子顺磁共振(EPR) (electron paramagnetic resonance) 电子自旋共振(ESR) (electron spin resonance) EPR是检测自由基的直接方法 直接方法 (低温,液氮77K,液氦4K) 间接方法 (自旋捕集剂) 自旋捕集技术 自旋捕集剂 亚硝基类:对光和热不稳定 R-N=O + Rx.?R-N-O 表征自由基的重要参数 g因子 ?常数(超精细分裂常数) ?常数 ?N, ?H?分别为N原子和?-H原子引起的分裂波峰间的距离. ?N, ?H? DMPO/?OH 14.9G 14.9G DMPO/?O2- 14.3G 11.7G PBN /?OH 15.3G 2.75G PBN /?O2- 14.8G 2.75G ?O2-的检测方法 电子顺磁共振法 光谱法 化学法 H2O2的检测方法 光谱法 ?max=240nm CAT确认 化学法 KMnO4,KI,SCN- 2MnO4-+5H2O2 +6H+?5O2 +Mn2++8H2O 2I- +H2O2 +2H+?2H2O+I2 Fe2++H2O2 ? Fe3++ .OH + OH- Fe3++SCN- ? Fe(SCN)3 1O2的检测方法 * 第七章 自由基研究方法 物理方法 脉冲射解,快速停留, 顺磁共振,自旋捕集 化学方法 可见光,紫外光,及荧光分光光度法 电子顺磁共振原理 电子在轨道 中成对时 电子在轨道中不成对时 磁矩抵消 磁矩 磁场H S=1/2 +1/2 g?H -1/2 g?H ?H=g?H 高频磁场 h?=g?H 玻尔磁子 无因次数值2.003 电子能与辐射场共振. 共振时平行的电子比反平行的多, 引起向电磁场作能量的净吸收. 对于这能量的净吸收进行检测, 放大而成为EPR信号. 分裂线数:非偶电子附近 原子核分布 信号强弱:非偶电子的多少 H EPR灵敏度: -10-8mol.L-1 实测: -10-6mol.L-1 自旋捕集剂+ FR?自旋加合物 长寿命FR, 具有特征信号 活泼, 寿命短 抗磁性 物质 . Rx 硝酮类 PBN(?-苯-叔丁基硝酮) CH=N+-Me3 O- DMPO(5,5-二甲基-吡咯啉-N-氧化物) N+ O- CH3 CH3 + .OH? N+ CH3 CH3 OH H O. ? ? g因子 没有量刚 反映未成对电子自旋角动量和轨道角动量之间的偶合 电子:2.003 半醌:2.003-2.005 氮氧:2.005-2.006 过氧:2.001-2.080 硫:2.02-2.06 Cu2+:2.0-2.4 Fe3+(低):1.4-2.1 Fe3+(高):2.0-9.7 ?N, ?H? DMPO/?OH 14.9G 14.9G PBN /?OH 15.3G 2.75G 电子顺磁共振法(EPR) 低温,液氮77K ?N, ?H? DMPO/?O2- 14.3G 11.7G PBN /?O2- 14.8G 2.75G 光谱法 ?max=250、325、420nm SOD确认 nm A 化学法(CytC) HX → 尿酸 X.O O2 .O2- CytC(Fe3+)→ CytC(Fe2+) 550nm 557nm O2 ?A(550-557nm) ?=21.0L.mol-1cm-1 ?OH的检测方法 电子顺磁共振法 荧光法 化学发光法 分光光度法 14C标记法 气相色谱法 电子顺磁共振法(EPR) ?N, ?H? DMPO/.OH 14.9G
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