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二、化学消毒灭菌法 (一)杀菌机制 1、促进菌体蛋白变性或凝固 2、干扰细菌酶系统及代谢 3、损伤菌细胞膜 第四节 影响消毒灭菌效果的因素(简) 第五节 病原微生物实验室生物安全 生物安全(biosafety)是生物技术安全(safety of biotechnology)的简称。 病原微生物实验室生物安全的核心是防扩散和防感染。 一、病原微生物的分类 ??? 根据传染性、感染后对个体或者群体的危害程度,病原微生物分为四类: 第一类:能引起人类或者动物非常严重疾病的微生物,以及我国尚未发现或者已宣布消灭的微生物。 (天花病毒、新疆出血热病毒等29种) 第二类:能引起人类或者动物严重疾病,比较容易直接或间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。(高致病性禽流感病毒、HIV、狂犬病毒、SARS冠状病毒、结核杆菌等70种) ???第三类:能引起人或动物疾病,但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害,传播风险有限,实验室感染后很少引起严重疾病,并且具备有效治疗和预防措施的微生物。(肝炎病毒、沙眼衣原体、破伤风梭菌、伤寒沙门菌等275种) 第四类:指在通常情况下不会引起人或动物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。 ??? 第一类、第二类统称为高致病性病原微生物。 二、病原微生物实验室的分级 三、实验室感染的控制 以及监督和法律责任 (简/略) 一、二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动。三级、四级实验室可从事高致病性病原微生物实验活动。 ? 实验室感染控制工作包括定期检查实验室的生物安全防护、病原微生物菌(毒)种和样本保存与使用、安全操作、实验室排放的废水和废气以及其他废物处置等实施情况。 实验室发生高致病性病原微生物泄漏时,预防、控制措施包括:①封闭被病原微生物污染的实验室或可能造成病原微生物扩散的场所;②开展流行病学调查;③对病人进行隔离治疗,对相关人员进行医学检查;④对密切接触者进行医学观察;⑤进行现场消毒;⑥对染疫或者疑似染疫的动物采取隔离、扑杀等措施。 对人体、动植物或环境具有高度危险性,通过气溶胶途径传播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有预防治疗措施。 四级 对人体、动植物或环境具有高度危险性,主要通过气溶胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病,或对动植物和环境具有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。 三级 对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病因子,对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害,具有有效的预防和治疗措施。 二级 对人体、动植物或环境危害较低,不具有对健康成人、动植物致病的致病因子。 一级 处理对象 级别 二、细菌在培养基中的生长情况 据物理状态分 1、液体培养基: 均匀混浊、沉淀生长、表面生长(菌膜); 多用于增菌 2、固体培养基: 含1.5%琼脂 用于分离培养 菌落:单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见 的细菌集团. 纯培养:挑取一个菌落,移种到另一培养 基中,生长出来的细菌均为纯 种,称为纯培养。 菌落特征-大小、形状、颜色、气味、透明度、光滑或粗糙、湿润或干燥、隆起或扁平、边缘整齐与否、是否溶血等→有助于细菌鉴定 菌落(S型) 菌苔 菌落(R型) 光滑型(S型) 粗造型(R型) 粘液型(M型) 3、半固体培养基:含0.3%~0.5%琼脂 有鞭毛菌—混浊生长(沿穿刺线呈云雾状/羽毛状) 无鞭毛菌—沿穿刺线呈线状生长 用于检测细菌的动力和保存菌种 三、人工培养细菌的用途 在医学中的应用 1.感染性疾病的病原学诊断:药敏 2.细菌学的研究:细菌遗传、变异、耐药性 3.生物制品的制备:疫苗、类毒素、抗毒素 在工农业生产中的应用 (抗生素、维生素、酶制剂等) 在基因工程中的应用( 基因工程菌-乙肝疫苗) 传统分类 据生物学性状分类 2.种系分类法(phylogenic classification ) 自然分类法 (natural classification) 以细菌的发育进化关系为基础 第五节 细菌的分类 (简) 一、细菌的分类原则与层次: 分类层次与单位: 域 (Domain ) 属 (Genus) 门 (Phyllum) 种 (Species) 纲 (Class) 亚种/变种(Subspecies/variety) 目 (Orde
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