稻曲病菌分离技术、培养条件研究.pdfVIP

辽宁农业科学 2009(6)：20～22 LiaoningAgriculturalSciences 文章编号 ：1002—1728(2009)06—0020—03 稻 曲病菌分离技术、培养条件研究 刘明霞 ，秦 姝 ，李 颖 ，王 疏 (1．沈阳农业大学植物保护学院，辽宁 沈阳 110161； 2．辽宁省农业科学院，辽宁 沈阳 110161) 摘要 ：采用组织分离法、厚垣孢子悬液法、菌核萌发法对稻曲病菌进行分离，对不同培养条件下稻曲病菌的生 长特性进行了研究。结果表明：3种分离方法均可以分离到稻 曲病菌。其 中厚垣孢子悬液法分离成功率最 低 ，只有 5．3％，其次组织分离法分离成功率为 8．5％，菌核萌发法分离成功率最高，可达92．3％。供试的8种 培养基 中，以胁本哲氏培养基最适于病原菌生长，生长速率为 1．15mm／d；15—35℃菌丝均能生长，25—3O℃ 下菌丝生长速率 明显大于其他温度处理 ；pH值 3—1O菌丝均可生长，最适 pH值为 6。 关键词 ：稻曲病 ；稻 曲病菌；分离方法 ；培养条件 中图分类号 ：$435．111．4 文献标识码 ：B 稻 曲病 (FalseSmutofRice)是 由稻 曲病 菌 葡萄糖 20g，琼脂 17g，水 1000ml；马铃薯蔗糖 [Ustilaginoideavirens(Cooke)Takahashi]引起 的 培养基 (PSA)：马铃薯200g，蔗糖20g，琼脂17g， 一 种水稻穗部病害 ，广泛分布于世界各稻 区。随 水 1000ml；胁本哲氏培养基 ：马铃薯200g，蔗糖 着水稻施肥量的增加、籼粳杂交稻 的育成和大面 15g，蛋 白胨 5g，Ca(NO3)2 ·4H2Og0．5g， 积推广 ，稻曲病的发生 日趋严重，已经成为水稻生 Na2HPO4·12H202g，琼脂 17g，水 1000ml；YP- 产上的一个主要病害。同时稻 曲病菌可产生对人 PDA培养基：马铃薯 200g，葡萄糖 20g，蛋 白胨 畜有害的毒素，严重影响水稻的品质和食用安全。 0．1g，酵母膏0．1g，琼脂 17g，水 1000ml；燕麦 自1878年 Cooke报道稻曲病 以来 ，国内外许 片培养基 ：燕麦片 30g，琼脂 17g，水 1000ml；玉 多学者对稻曲病菌进行 了研究 ，但 由于稻曲病菌 米粉培养基 ：玉米粉200g，琼脂 17g，水1000ml； 寄生性强，腐生性弱 的特点，分离培养有一定难 大米汁培养基 ：大米200g，琼脂 17g，水1000ml； 度 ，在一定程度上限制 了稻曲病菌生物学研究的 大米粒培养基 ：大米 30g，水 30m1，煮沸 30min 进展。本试验在周永力等的研究基础上 ，进一步 后灭菌。 探索稻曲病菌的分离方法和培养条件 ，为稻 曲病 1．2 方法 菌生物学特性 的研究提供 了一个快捷有效地分离 1．2。1 分离方法 培养方法。 组织分离法 ：将稻 曲球放入 75％乙醇溶液中 1 材料和方法 浸泡5S后燃烧 ，至 自然熄灭，切取 内层组织小 1．1 材料 块 ，斜插入 PSA(含硫酸链霉素50Ixg／m1)培养基 1．1．1 分 离材料 平板 中，26～28℃黑暗培养。 新鲜的稻曲球及菌核于 2008年 9月采 自辽 厚垣孢子悬液法 ：将稻曲球放入 75％乙醇溶 宁省辽中县长滩镇大兀拉村的稻田。 液中浸泡消毒 10s，无菌水冲洗 3次 ，放入盛有