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HPLC测定人尿液三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸浓.doc
HPLC测定人尿液三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸浓_基础医学论文 【摘要】 目的建立测定人尿液三苯双脒次级代谢物对苯二甲酸(tpa)浓度的高效液相色谱法(hplc)。方法 以阿魏酸为内标(internal standard, is),志愿者尿样稀释后经ultimate xbc18柱(4.6mm×200mm,5μm)、流动相甲醇-1%醋酸(35∶65,v/v)分离,在检测波长为240nm、流速为 0.8ml/min、柱温为30℃条件下采用hplc分析。结果在1~400μg/ml内,tpa与is的峰面积比值与浓度线性关系良好(r=0.9954),定量下限为1μg/ml,低、中、高浓度的相对回收率分别为(106.0±4.4)%、(107.4±4.2)%和(108.5±2.4)%,批内和批间相对标准偏差(rsd)小于8%。结论方法符合生物样品分析要求,可用于三苯双脒次级代谢物tpa尿液浓度的测定。【关键词】 三苯双脒 对苯二甲酸 高效液相色谱法 尿 terephthalic acid by hplc xu jie1,2, yuan guiyan1, wei chunmin1, wang benjie1, guo ruichen1 (1. institute of clinical pharmacology, qilu hospital of shandong university, jinan 250012, china; 2.department of bioengineering, zibo vocational institute, zibo 255013, shandong, china) to develop a hplc method for determination of tribendimidine metabolite terephthalic acid (tpa) concentration in human urine. methods diluted urine was separated on the ultimate xbc18 column (4.6mm×200mm, 5μm), eluted with methanol and 1% glacial acetic acid (35∶65, v/v) at 0.8ml/min and 30℃, and detected at 240nm with ferulic acid as an internal standard (is). results a good linearity was obtained from 1 to 400μg/ml (r=0.9954). the lower limit of quantitation (lloq) was 1μg/ml. the relative recoveries were (106.0±4.4)%, (107.4±4.2)% and (108.5±2.4)% at 3, 25 and 200μg/ml, and the intra and interbatch relative standard deviations (rsd) were less than 8% for all quality control samples. conclusion the developed hplc method is proved to meet the requirements of biological sample analyses, and is appropriate for determination of urinary tribenmidine metabolitetpa in human urine. key words: tribendimidine; terephthalic acid; high performance liquid chromatography; urine 三苯双脒(tribendimidine)是新型广谱驱肠虫药[13],化学名为n,n′双[4′(1二甲氨基乙亚氨基)苯基] 1,4苯二甲亚胺,po后于体内迅速分解为对(1二甲氨基乙亚氨基)苯胺(p(1dimethylamino ethylimino) aniline,dadt)和对苯二甲醛(1, 4phthaladehyde),对苯二甲醛经过体内酶氧化,迅速转化为对苯二甲酸(terephthalic acid,tpa)自尿中排泄;血中无对苯二甲醛检出。wwW.133229.cOm国内外文献多报道三苯双脒临床应用或药效学,鲜有其人体内处置过程[4]。文献报道[56]人尿液对苯二甲
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