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elisa immunoassay kit Manual /file/1849888 From ManualL ManualL collects and classifies the global product instrunction manuals to help users access anytime and anywhere, helping users make better use of products. Home: / Chinese: / This Manual: /file/1849888 人chemerin酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用 预期应用 ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关液体中chemerin含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中chemerin水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相 抗体，往包被单抗的微孔中依次加入chemerin抗原、生物素化的抗人chemerin抗体、HRP标记的亲和素， 经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的 黄色。颜色的深浅和样品中的chemerin呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算 样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板：一块（96孔） 2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠 倒/搓动以助溶解，其浓度为20,000 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释10,000 pg/ml，5,000 pg/ml， 2,500 pg/ml，1,250 pg/ml，625 pg/ml，312.5 pg/ml，156 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml， 临用前15分钟内配制。 如配制10,000 pg/ml标准品：取0.5ml 20,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的 Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。 4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。 5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。 6. 检测溶液A：1×120ul/瓶（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次 实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如1ul检测溶液A加99ul检测稀 释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 7. 检测溶液B：1×120ul/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。 8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 标本的采集及保存 1. 细胞培养物上清：请离心后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融。 2. 血清：标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本 放于-20℃保存，但应避免反复冻融。 3. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或 将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。 注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶