小反刍兽疫病毒v蛋白拮抗干扰素介导的先天性免疫系统功能位点的确定-预防兽医学专业论文.docx

Secrecy：No．ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationIdentificationcation ofAminono-acidacidResiduesResiUinthetheVVProteinroteinPeste．．Des．．Petits．．RuminantsEssentialforInterferenceandSuppressionofIFN-mediatedInnateImmuneSystemPh．D．Candidate：MaXushengSupervisor：ProfessorCaiXuepengMajor：PreventiveVeterinaryMedicineSpecialty：AnimalvaccinemolecularimmunologyMay2015万方数据独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：婀灿“、lB关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定。即：中国农业科学院有权保留途交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。)研究生签名：时间：．士|x釜{At沁|导师签名：时间：勿厶，j’年厂月／声万方数据中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目小反刍兽疫病毒V蛋白拮抗干扰素免疫系统功能位点确定论文作者马旭升专业预防兽医学研究方向动物疫苗与分子免疫学指导教师才学鹏培养单位(研究所、中心)兰少II兽医研究所硕(博)姓名职称单位专业签名导师硕导口＼＼评博导口阅硕导口＼＼硕导口＼博导口人博导口答辩硕导口主杨孝朴教授博导囱甘肃农业大学预防兽医学缘锄Ⅵ周泽扬教授硕导口重庆师范大学应用生物学舳席博导函殷宏研究员硕导口兰州兽医研究所预防兽医学易窖㈤博导函答硕导口曾巧英教授甘肃农业大学预防兽医学博导囱朱兴全研究员博导仞兰州兽医研究所预防兽医学蜘／辩硕导口委V付宝权研究员博导日兰州兽医研究所预防兽医学砑忱’硕导口贝张德林研究员硕导口兰州兽医研究所‘’预防兽医学以姚础博导d一硕导口l博导口会议记录(秘书)张少华论文答辩时间地点2015．05．17兰州兽医研究所综合楼5楼学术报告厅万方数据摘要小反刍兽疫(PesteDesPetitsRuminants，PPR)是由小反刍兽疫病毒(PesteDesPetitsRuminantsVirus，PPRV)感染引起的一种高感染性、高致死率疾病。PPRV感染严重损伤宿主动物靶器官，导致巨大的经济损失。目前对于PPRV的发病机制、感染损伤机制以及免疫抑制机制研究不多。本文利用荧光素酶检测发现，过表达西藏毒株PPRV V蛋白能够抑制干扰素的产生和干扰素的信号转导。通过缺失突变技术发现，V蛋白C端对于干扰素的产生起到关键作用。为探明V蛋白的C端抑制干扰素产生的分子机理，进一步采用PPRV V蛋白、V蛋白缺失和单位点突变体共沉淀RLRs通路中的MDA5、RIG—I模式识别受体。结果表明，PPRV V蛋白能够通过其C端的半胱氨酸残基结合MDA5，但对于RIG．I介导的IFN的产生没有影响，同时利用荧光素酶检测发现，V蛋白的C端可利用LGP2模式识别受体的协助，抑制RJG．I介导的IFN的产生。实验研究发现，PPRVV蛋白能够抑制IFN介导的信号转导，利用v蛋白及其突变体，通过荧光素酶检测、免疫共沉淀、pull．down、VSV．GFP感染复制等实验手段，证实PPRV V蛋白的C端抑带IJSTAT2介导的干扰素的信号转导，而PPRV V蛋白的N端却抑常IJSTATl介导的干扰素的信号转导。深入研究还发现，PPRVV蛋白的C端利用其Cys残基和Trp残基结合STAT2，进而改变STAT2的亚细胞分布：PPRVV蛋白的N端利用Y110位氨基酸残基结合STATl进而改变STATl的亚细胞分布。本文深入研究了PPRVv蛋白引起宿主细胞先天性免疫抑制的分子机制，阐明了V蛋白在PPRV抑制I也Rs介导的干扰素产生和干扰素介导的信号转导中的作用，为深入了解PPRV感染引起的免疫抑制提供重要的研究基础。关键词：小反刍兽疫病毒v蛋白，黑色素瘤分化分化相关抗原5，干扰素，信号转导和转录因子万方数据AbstractPestedespetitsruminantsdisease(PPRV