斑马鱼(Danio rerio)母源性抗体的传递及其对子代的保护作用汇总.pdfVIP

中国海洋^学Ⅲ±学Ⅱ论i 斑马鱼(Danio，-erio)母源性抗体的传递及其对子代的保护 作用 摘要 对于绝大多数为卵生的硬骨鱼来讲，其受精卵在体外发育，而其赖以发育的 水环境中存在着多种细菌、病毒和寄生虫，对新生J|=【；胎构成威胁。另一方面，在 胚胎发育的早期，硬骨鱼类的免疫系统尚不完善，不能引发有效的适应性免疫， 因此必须依赖卵自身储存的各类免疫因子以抵御病原体。业已证明，在多种硬骨 鱼中，抗体可由亲鱼台成后，通过储存在卵中的方式传递给子代并在J|=li胎发育的 早期拉挥抵御病原体的作用。斑马鱼已被用作研究脊椎动物免疫系统发生和功能 的良好材料．然而其母源性抗体的传递还未见报道．母源性抗体是否参与早期胚 胎的抗细菌感染作用也不清楚。 在本论文实验第一部分中，我们(1)采用TNP．BSA(三硝基苯-牛血清白蛋 白)这种半抗原．载体复合物免疫雌性斑马鱼，通过ELISA的方法对其所产卵中 抗体的抗原特异性进行了检测，结果表明经TNP—BSA免疫后．雌性斑马鱼所产 卵中也具有了抗．TNP的抗体。ELISA分析还揭示了雌性斑马鱼血清中和所产卵中 抗一TNP抗体水平的相关性，从而证明了斑马鱼母源性抗体的传递。(2)利用抗 艟马鱼lgM抗体，对胚胎发育各时期的胚胎／幼鱼体内存在的母源性lgM进行了 Western blot检测，揭示了揭示母源性IgM在受精后持续存在的时间，发现其在受 精后的第5天消耗完毕。(3)通过显微注射，向原肠胚时期的斑马鱼胚胎卵黄囊 一p注入嗜气单胞杆菌(』hydrophila)，这能够导致一些胚胎因感染死亡。注射 嗜水气单胞杆菌的同时，向且￡胎中注射抗-斑马鱼IgM抗体以阻碍母源性IgM发挥 作用，导致了胚眙死亡率的增加。显微注射宴验还表明，胚胎中较高母源性IgM 的水平能够降低胚胎在遭遇嗜水气单胞杆菌感染后的死亡率。这说明斑马伯卵内 母源HHgM参与月t腑早期免疫。 十厨海洋^学碰L学位呛立 车绝堑坟验第一音li分是一个探索1】_}_的爿f分，我们把人肠杆菌(E．coli)与斑 1§靠j卵提戢澉孵商，然后对结余于细菌袁而上【i勺，曩【马伯卵中的成分进行蚩闩赝 谱分析，垃终箍定…包括肌肉型肌球虽白、网蛋¨、几J质酶、卵黄蛋白原、肌 球蛋白轻链馓酶、丝氨酸，苏氨酸蛋白质激酶、LF[蛋白d-内的7种能与细菌表面 艟牛结合的蛋白质。根据已有的报道，结合这些蛋白在成体动物中所发挥的作片|， 讨论并推测了它们在硬骨鱼卵中可能存在的免疫作用。 总斯言之，木文实验证明了斑马鱼母源性抗体山亲鱼向亍代的传递及其在早 期胚胎中的免疫功能，揭示了母源性lgM在胚胎中的持续时期。此外，迁涸过 探索性的实验，芨现了一批潜在的可能在胚胎发育早期作为先天性免疫因子而存 在的蛋自成分。 关键词：斑马鱼：母源性抗体：抗菌活性；先天性免疫因子；质谱 Maternaltransfer and roleofantibodiesin protective zebrafishDanio rerio Abstract Fish areinmostcases eclosed eggs cleidoic，i flee-livingsystem fertilizationIn fish water,the of withunmatured following embryos immune arethreatennumerous system by pathogensincludingbacteria， virus