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实验四 离子及强心甙对离体蛙心的影响 Effcts of several drugs and extracellular ions on isolated Toad heart 实验中心 机能实验室 周迎春 【实验目的】 【实验原理】 【实验器材】 ※ 【实验方法】 【注意事项】 【实验目的】 (Objectives) 1．学会离体蛙心制作方法，掌握蛙心插管方法 2．观察离子、递质、酸碱及强心甙对心脏活动的影响 【实验原理】(Principle) 心脏受体液和神经的调节和影响 【实验器材】(Materials) ※【实验方法】（methods） ※ 一、毁中枢 ※ 二、暴露心脏 ※ 三、制备离体心脏进行蛙心插管 四、连接装置 五、 微机操作 六、观察项目 ※【实验方法】 一、毁中枢 1、捉拿方法 2、确定枕骨大孔位置 3、破坏脑和脊髓 4、脑和脊髓破坏的标志 【实验步骤】 二、暴露心脏 1、固定 2、开胸 并充分暴露出心脏 剪口位置、心包膜 3、蛙心腹背面观,识别蛙心各部分 二、暴露心脏 1、仰卧位固定在蛙板上 2、夹起胸部皮肤，用中剪刀将皮肤剪出 一个以两侧锁骨中点连线为底边的倒置 的等边三角形 3、用镊子提起剑突，剪去同样大小的一块 肌肉组织 4、剪断锁骨 5、剪去胸骨 6、去尽心包膜，充分暴露出心脏 7、蛙心腹背面观,识别蛙心各部分 三、制备离体心脏进行蛙心插管 插管前准备:手术线、蛙心插管、任氏液、眼科剪、眼科镊 两根线、一个口、一次退 三、制备离体心脏进行蛙心插管 1、在主动脉干下穿一手术线，结一松结留作固定插管用 2、剪去左右主动脉间膜组织 3、在左主动脉下穿一手术线，在左主动脉远端结扎，线头留用。 三、制备离体心脏进行蛙心插管 4、根据蛙心插管前端的长短确定剪口位置,用眼科剪在左主动脉适当位置剪一向心斜切口（要剪破血管内膜，心室收缩时有血液从切口涌出证明已剪破内膜，但不要剪断血管） 5、右手持盛有少量任氏液的蛙心插管由此切口插入主动脉，插至动脉圆锥时,将插管稍后退,在心室收缩时插入心室内，可见插管内液体喷入血液并随心室的舒缩而上下波动。 三、制备离体心脏进行蛙心插管 6、用线将动脉结扎固定于插管上，并 将结扎线固定于插管的侧面突起上, 以防插管滑出心室 7、立即吸去插管内的血液，换取任氏 液，以免凝血。 三、制备离体心脏进行蛙心插管 8、提起插管，剪去与心脏相连的其它 组织，不要损伤静脉窦 9、用新鲜任氏液换取蛙心插管内含血 的任氏液数次，直至插管内任氏液 完全清澈。 10 、插入心室内的标志是插管内的液 体随心搏而上下搏动 四、连接装置 (connect equipment) 五、微机操作 启动微机进入MedLab系统，调节仪器参数，开始实验。 五、观察项目 (observe item) 2、离子的影响 （1）吸出插管内全部任氏液，换入0.65％ NaCl，观察曲线的变化。待效应明显后， 新鲜任氏液换洗三次，直至曲线恢复正常 （2）加2％CaCl2 1-2滴于新换入的任氏液 中，观察曲线变化。出现效应后用新鲜任氏 液换洗，直至曲线恢复正常 （3）加1％KCl 1-2滴于新换入的任氏液 中，观察曲线变化。出现效应后用新鲜任氏 液换洗，直至曲线恢复正常 3、递质的作用 加10-4肾上腺素1-2滴于新换入的任氏液中，观察曲线的变化。待效应明显后，用新鲜任氏液换洗，直至曲线恢复正常 4、酸碱的影响 加3％乳酸1-2滴于新换入的任氏中，观察曲线变化。待效应明显后，加2.5％NaHCO3 1-2滴,观察曲线变化。待效应明显后，换洗，直至曲线恢复正常 ５、强心甙的作用 （1）蛙心插管内换入低钙任氏液，观察心脏活动曲线变化（制作心功能不全模型）。 （2）当心脏收缩明显减弱时，向蛙心插管内任氏液中加入去乙酰毛花甙注射液，观察心脏活动曲线变