药物分析 第11章 抗生素类药物的分析精品.ppt

FeCl3反应 （二） Cl-反应 （三） 1mol/L盐酸-甲醇（1→100） 0.01mg/ml UV法 （四） 荧光法 （五） UV 绿色荧光 H+ UV 麦芽酚反应 （三） 链霉糖特有反应 H+ 分子重排 紫红 麦芽酚 链霉胍特有反应 （或α-萘酚） 8-羟基喹啉 坂口反应 （四） α -萘酚 （四） 反应 H+ UV法 （五） IR法 （六） 庆大霉素无UV吸收 TLC法 （七） 三、 检查 链霉素杂质 （一） 链霉素B（甘露糖链霉素） 方法 TLC中的对照品法 （BP） 1. 来源 反应中间体 对微生物的活性无明显差异 毒副作用和耐药性不同 发酵菌种不同 工艺差别 C组分比例 不一致 规定控制各组分的相对百分含量 ChP USP BP JP 庆大霉素C组分的测定 （二） λmax = 330nm 衍生化原理 1. 1-烷基硫代-2-烷基 异吲哚衍生物 RP－HPLC 方法 2. 规定 C1 25~50% C1a 15~40% C2a +C2 20~50% 计算 3. 峰面积归一化法 三、 含量测定 链霉素、庆大霉素 微生物检定法 本法系利用抗生素在琼脂培养 基内的扩散作用量反应平行线原理 的设计，比较标准品与供试品两者 对接种的试验菌产生抑菌圈的大小 ，以测定供试品效价的一种方法。 四、血清中庆大霉素的HPLC法 血浆样品的预处理 离子对色谱法的目的： 除去氨基酸、肽、胺的干扰 选用OPA为荧光衍生化试剂 采用柱后衍生化法 第四节 四环素类抗生素 A B C D 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 四环素（TC）tetracycline 金霉素 (CTC) chlortetracycline 氯四环素 土霉素 (OTC) oxytetracycline 氧四环素 多西环素 (DOTC) doxycycline 脱氧土霉素 美他环素（METC） metacycline 一、 结构与性质 两性 （一） 1. 与酸、碱均能成盐 2. 强酸或强碱中溶解度↑ 酚羟基、烯醇型羟基 弱酸性 二甲胺基 弱碱性 吸湿性 （二） 多含结晶水 与金属离子生成有色配位化合物 Ca2+ Mg2+ Fe3+ Al3+ UV （三） 与金属离子络合 （四） pH3 ~ 7.5 荧光 不稳定性 （四） 1. 差向异构化 淡黄→黑 蓝色荧光 差向四环素 （土霉素、多西环素不易差向异构化） 2. 降解反应 （1）酸性下降解 λmax = 445nm λmax = 435nm 橙黄色 脱水四环素 ～ ～ TC ETC ATC EATC ＜ ＜ （2）碱性下降解 （荧光） 二、 鉴别试验 H2SO4反应 （一） 3、 讨论 （1）水解前先中和溶剂和样品 （2）加热时避免吸收CO2 △ 不能使酚酞变红 （3）空白试验校正(消除Na2CO3干扰) （4）特点 简便快速 不适用于有残留酯的产品 （水解） 可见-紫外分光光度法 （四） 1、 酸水解法（铜盐法） （1）原理 稳定剂 JP 青霉素族 （2）方法 △ （3）特点 实验条件随各药物稳定性不同而定 标准品对照法 （4）计算 2、 硫醇汞盐法 （1）原理 （咪唑） 青霉素族 ChP 咪唑 （2）方法 对照品法 计算 pH 9 例 氨苄西林钠 含量测定 取本品约60mg 置100ml量瓶中，加 水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取 5ml，置另一100ml量瓶中，加水稀释至 刻度，摇匀，再精密量取5ml，置25ml 量瓶中，加硼酸缓冲液2.5ml与醋酐的乙 腈溶液（1→50）0.25ml，放置5min后， 加咪唑溶液至刻度，摇匀，置60℃水浴 中，加热30min，取出冷却，照分光光度法（附录Ⅳ A ），在325nm的波长处测定吸收度；另取氨苄西林三水合物标准品，按同法测定，计算，即得。 （3）讨论 a. 咪唑催化的水解产率高，硫 醇汞盐稳定（≥3h） b. 侧链有-NH2时，需加醋酐先 将其乙酰化后才能发生上述 反应 pH9 （4）特点 A、简便快速 B、用标准品对照，重现性良 好，RSD≤1% 3、 羟肟酸