第八篇章真核生物基因的表达调控.pptVIP

Eukaryotic response elements. Response Element Transcription Factor Consensus Sequence MRE metal CGNCCCGGNCNC CRE CREB (cAMP) TGACGTCA ERE Estrogen receptor 雌激素 AGGTCANNNTGACCT GRE Glucocorticoid receptor 糖皮质激素 AGAACANNNTGTTCT HSE Heat shock factor GAANNTTCNNGAA TRE 佛波酯 TGACTCA SRE Serum response factor 血浆反应因子 CC(A/T)6GG ERE Ethylene 乙烯 AGCCGCCT *(A/T)6? means six A or T; N = any. 2、诱导型转录因子活性调控 合成后即有活性：需要时合成，可迅速降解 共价修饰：磷酸化-去磷酸化，糖基化 配体结合：如激素与受体的结合 蛋白质与蛋白质相互作用：二聚体 3、热休克应答（P281） HSP（heat shock protein) aa序列高度保守 蛋白质功能高度保守 是一种分子伴侣chaperone hsp基因 核苷酸序列高度保守，如人与E.Coli 40～60％ 多基因家族，多拷贝，成簇存在 大部分无内含子，如hsp70，转录后不须剪切即可产生成熟mRNA，适应需要 感染真核细胞的病毒DNA大多具有增强子，可被寄主细胞蛋白质激活。 小鼠乳腺瘤病毒（MMTV）：具有糖皮质激素基因的增强子，能在被类固醇激活的细胞（如乳腺上皮细胞）中旺盛生长。 病毒有寄主范围，因它有组织特异和物种特异的增强子 三、反式作用因子(trans-acting factor) 反式作用因子三个功能结构域 1. DNA结合域 (DNA-binding domain)； 2. 转录激活域 (transcriptional activation domain)； 3. 结合其它蛋白的结合域 为DNA结合蛋白，核内蛋白，可使邻近基因开放（正调控）或关闭（负调控）。 1）螺旋-转角-螺旋（helix-turn-helix，HTH） 2）锌指结构（zinc finger） 3）碱性-亮氨酸拉链 （basic-leucine zipper，bZIP） 4）碱性-螺旋-环-螺旋（basic-helix/loop/helix，HLH） 5）同源域蛋白（homeo domain，HD） 1、反式作用因子DNA结合域的模式（motif ） 1） HTH, Helix-turn-helix 2个?螺旋被一个?转角隔开 识别螺旋，与DNA在大沟中特异结合 λ阻遏蛋白 CRP 酵母接合型调控蛋白α1，α2 许多调控蛋白都有HTH Cys2/His2, 经典的锌指结构 ~23aa Cys- X2-4- Cys-X3-Phe- X5 -Leu- X2 -His- X3 -His Cys、His与Zn++结合形成4面体结构，中部芳香族氨基酸保守，疏水 串联重复排列，两指间7-8aa 锌指数目多少不等 2）锌指结构(zinc finger motif)：两种 SP1 TF IIIA 344aa，N端与DNA结合 9个锌指，每个～30aa 与5s rRNA基因内启动子（50bp)结合 Cys- X2- Cys-X13—Cys- X2- Cys Zn++与4个Cys结合 DNA结合序列较短，对称 无大量重复性锌指 例如GAL4，酵母的转录因子 哺乳类的固醇类激素受体 Cys2/Cys2 zinc finger -COOH，每隔6个氨基酸出现一个Leu，所有Leu出现在同一侧面，成直线排列，形成疏水面 -NH2，富含碱性氨基酸，碱性DNA结合域 依靠Leu的疏水作用，2个helix 相互缠绕，形成拉链结构 3） bzip（P262） 40～50aa 含2个?-helix（15~16aa）, 由连接区（12~28aa）连接；两亲性；通过疏水面作用形成二聚体 －NH2端为碱性结合区，16aa 4） bHLH （ Helix-loop-helix） MyoD-DNA 缺乏碱性区的蛋白质，即使形成（同、异）二聚体，也无法同DNA结合 zyj278 最早在果蝇中发现同形异位现象(homeosis): 果蝇头部长触角部位长出脚来 同形异位盒基因(homeobox) :高度保守的一段核苷酸序列（180bp），控制胚胎发育的基因 从酵母到人类都存在 5）同源域蛋白 Homeo domai