呼吸道苛养菌耐药机制及检测精品.pptVIP

肉汤稀释法 离子校正的M-H 肉汤加入2 %～5 %溶解马血 直接菌落悬液 ，浊度为0. 5麦氏标准 在35 ℃,空气环境孵育20～24h 质控菌株：肺炎链球菌 ATCC49619 从脑膜炎分离的肺炎链球菌,应测青霉素、头孢他啶、头孢曲松、美罗培南和万古霉素的MIC 若发现对万古霉素、氟喹喏酮耐药，应排除实验误差或送参考实验室。 中枢神经系统以外分离的肺炎链球菌,实验室首先用苯唑西林筛选β－内酰胺类药物是否耐药，但不推荐用苯唑西林纸片检测肺炎链球菌以外的链球菌对青霉素的敏感性。 红霉素可代表对阿奇霉素、克拉霉素和地红霉素的敏感性；对大环内酯－林可霉素－链阳菌素B（MLBs）的耐药，可用D－试验检测。 “D Test” – 阳性反应 E 15 CC 2 常规血平板: 第一区要画 1/3, 长出一层菌 克林和红霉素贴后之间距为15毫米 可诱导的克林霉素耐药 (erm-介导) 临床实验室可采用NCCLS提供的纸片扩散法，做肺炎链球菌和某些链球菌大多数抗生素(不是全部)的药敏试验。 可将E—试验和纸片扩散法结合使用，在一个大的M－H羊血琼脂平板上做青霉素、头孢噻肟或头孢三嗪的E－试验。选用红霉素、复方磺胺、喹诺酮药物做纸片扩散试验。这样，既能降低E试验的成本费用，也能弥补纸片法的不足 。 耐药基因检测 流感嗜血杆菌 β-内酰胺类抗生素 四环素 氯霉素 复方新诺明 β-内酰胺类抗生素耐药 质粒介导β-内酰胺酶 TEM-1 ROB-1 非β-内酰胺酶介导的氨苄青霉素耐药(BLNAR)  PBPs 发生改变 对一些头孢菌素(如头孢克洛、头孢呋辛等) 耐药,对含β-内酰胺酶抑制剂的组合抗生素也不敏感。 编码变异的PBPs 的基因在细菌染色体而不是质粒上  药敏试验(K-B) 培养基－HTM 直接菌落悬液：5×105/ml 35℃ 5％CO2 16～18h 质控菌株：ATCC 49247 49766 Β-内酰胺酶测定(头孢硝噻吩法) 耐药基因检测 卡他莫拉菌 是呼吸道的正常菌群，过去一直认为无致病性，但80年代以来的观察发现已成为一种常见的致病菌，该菌可引起急性中耳炎、鼻窦炎、支气管肺部感染、脑膜炎、心内膜炎和败血症等各种感染 主要耐药机制及检测 β-内酰胺酶 位于染色体上 Β-内酰胺酶测定(头孢硝噻吩法) 耐药基因检测 * * * 呼吸道苛养菌耐药机制及检测 上海第二医科大学附属瑞金医院 吴文娟 社区获得性呼吸道感染的重要病原菌 肺炎链球菌 流感嗜血杆菌 卡他莫拉菌 肺炎链球菌耐药机制 PRSP MDRSP 1967年首次报道对青霉素耐药的肺炎链球菌。 20世纪80年代，在西班牙、匈牙利和南非等几个国家出现对青霉素高水平耐药的肺炎链球菌。 根据ANSORP监测的结果，在韩国、日本、香港、越南和泰国等亚洲国家，肺炎链球菌对青霉素、大环内酯类、氟喹诺酮类抗生素的多重耐药性的出现已引起世界上高度关注。 越南、香港和韩国引起侵袭性感染的肺炎链球菌对青霉素的耐药率在70%以上。 肺炎链球菌 青霉素中介和耐药菌株的百分率 pen-I (penicillin MIC 0.12–1 μg/ml) pen-R (penicillin MIC ?2 μg/ml) SW USA 9% 18% NE USA 10% 32% Brazil 13% 3% Mexico 36% 18% South Africa 36% 15% Saudi Arabia 31% 25% Hong Kong 4% 71% The Alexander Project 2000, Joloba et al. ICAAC 2001, Abstract C2-699 肺炎链球菌对青霉素的耐药情况（亚洲） 肺炎链球菌对青霉素的耐药情况（亚洲） 肺炎链球菌 大环内酯类耐药菌株的百分率 Macrolide resistance defined as erythromycin MIC ?1 μg/ml The Alexander Project 2000, Felmingham et al. ECCMID 2002 SW USA 26% NE USA 34% Brazil 3% Mexico 29% South Africa 19% Saudi Arabia 16% Hong Kong 81% 肺炎链球菌对大环内酯类的耐药情况（欧洲） Mean 17.2% Germany 7.8% Spain 35.2% - Alexander Project 1999, Europe 肺炎链球菌对大环内酯类的耐药情况（亚洲） ERY MIC90＞128μg/mL Spn Vietnam