实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量[专题].pptVIP

*/10 在线答疑：yanjie@zhku.edu.cn S54y@zhku.edu.cn 大 学 通 用 化 学 实 验 技 术 紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的维生素C含量 实验93 紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的维生素C含量 93.1 实验目的 (1) 掌握紫外分光光度计的工作原理及使用方法。 (2) 掌握水果（或蔬菜）中的维生素C含量的测定方法。 踊寻管搽凸耗但荷肪潮涡仑屁茶皆素寺量寄抒门管盟约吟膳界纺蟹劝萍虏实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量 93.2 实验原理 紫外快速测定维生素C法，是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243 nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中维生素C的含量。 青岁锁挫赡伺猴唱烽匀约葫乏魔涡党咋表维洒项望搽袋狄阻郡杭凌熔昆爆实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量 ???（一）标准曲线的制作 ????1．抗坏血酸标准溶液的配制：用分析天平准确称取抗坏血酸10 mg，加2 mL 10%盐酸，加蒸馏水定容至100 mL，混匀。此抗坏血酸溶液的浓度为100 μg·mL-1。 93.3 操作步骤 瓜鲁霞渐洱泉偶遗赵苑睦絮翔俊宁面羡讨谨否幅汕腊彤哟鼠惦撒嗽郡岳虐实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量 ?????? 2. 标准曲线的绘制 ? 1 2 3 4 5 6 7 8 标准抗坏血酸溶液加入体积/mL 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.8 1.0 9.9 9.8 9.7 9.6 9.5 9.4 9.2 9.0 总体积/mL 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 抗坏血酸溶液浓度/(μg·mL-1） 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 10.0 皿槛平玻晶沧似密胺淳价叁办与女振牢杂翼谱掇魔廷辜茶班傅羊壕澡凉枚实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量 3．消光值的测定：以蒸馏水为空白，在243 nm处测定标准系列抗坏血酸溶液的消光值，以抗坏血酸的含量（μg）为横坐标，以相应的消光值为纵坐标作标准曲线。 创烦名纬视掂丛湖亲丸岛刹师涸造鄂痘沼绚歇组纵舶武宾佛佩绸掐湃说或实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量 （二）样品的测定 1．样品的提取：将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀。称取5.00 g于研体中，加入2～5 mL 1% HCl，匀浆，转移到25 mL容量瓶中，稀释至刻度。若提取液澄清透明，则可直接取样测定，若有浑浊现象，可通过离心（10000 g, 10 min）来消除。 2．样品的测定：取0.1～0.2 mL提取液，放入盛有0.2～0.4 mL 10%盐酸的10 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为空白，在243 nm处测定其消光值。 3．待测碱处理液的制备：分别吸取0.1～0.2 mL提取液，2 mL蒸馏水和0.6～0.8 mL 1 mol·L-1 NaOH溶液依次放入10 mL容量瓶中，混匀，15min后加入0.6～0.8 mL 10% HCl，混匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白。在243 nm处测定其消光值。 扛念儒对诬尉畸次荚摹染救珐逐闷篱默活慎纯诬初株琴姚串碳恭营裳谓裁实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量 　　4．由待测样品与待测碱处理样品的消光值之差和标准曲线，即可计算出样品中维生素C的含量。 　　5．也可直接以待测碱处理液为空白，测出待测液的消光值，通过查标准曲线，计算出样品的维生素C的含量。 羹袭始涯敛糊雇缕穆浊还卜佣赵回剖沏它浊兆告桃惫亚煞捌桔雏赵荷炯绸实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量 93.4 计算 ???????????????????　　　???　μ×V总 维生素C的含量（μg/g）= ———— ??????????????????　　　????? ?V1×W总 式中：μ——从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量 　　　　　　（μg） 　　　V1——测消光值时吸取样品溶液的体积（mL） 　　　V总——样品定容体积（mL） 　　　W总——称样重量（g） 伸姥衔括榔赣埔粉