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ＨＩＶ 作业指导书 文件编号：ABCD-3-HV-01~08 第A版 编制： 审核： 批准： 生效日期：2006年8月8日 ABCD人民医院检验科 目 录 序号 主 题 内 容 代 号 页 号 1 HIV样品的采集和处理 ABCD-3-HV-01 4 2 HIV(1/2)抗体检测ELISA双抗原夹心法（丽珠试剂） ABCD-3-HV-02 6 3 HIV(1/2)抗体检测ELISA双抗原夹心法（中山试剂） ABCD-3-HV-03 8 4 HIV(1/2)抗体检测金标法(中山生物) ABCD-3-HV-04 10 5 HIV(1/2)抗体检测胶体硒法(美国雅培) ABCD-3-HV-05 12 6 HIV抗体检测(ELISA法) ABCD-3-HV-06 14 7 艾滋病筛查（初筛）实验操作规程 ABCD-3-HV-07 17 8 梅毒筛查（TRUST）实验操作规程 ABCD-3-HV-08 19 修 订 页 序号 文件编号 页码 需更改的内容 更改内容 批准人 批准日期 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 HIV样品的采集和处理 1 样品采集 11 血清样品采集:用注射器抽出3毫升静脉血室温下自然放置1－2小时待血液凝固和血块收缩后离心15分钟吸出血清备用。 1.2 抗凝血样品采集用加有抗凝剂的真空采血管抽取静脉血转移至加有抗凝剂的试管反复轻摇分离血浆和血细胞备用。应根据实验要求选用适当的抗凝剂(EDTA、肝素、橡酸等)如需进行病毒RNA测定,应在48小时以内分离血浆。 1.3 采样注意事项 1.3.1 临床采血技术规范及试剂说明书要求进行。 1.3.2 注意安全直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。建议采用真空采血管及蝶形针具,以免直接接触血液2 样品的保存 2.1 用于抗体检测的血清或血浆样品应存放于-20℃以下短期(1周)内进行检测的样品可存放于2－8℃。 2.2 用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃以下进行病毒RNA检测的样品如长期(3个月以上)保存应置于-80℃。 3 样品的运送 3.1 传递的样品应为血清或血浆除特殊情况外一般不运送全血。样品应置于带盖的试管内试管上应有明显的标记标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。随样品应附有送检送检应与标本分开不能混放。 3.2 入专用带盖的容器内容器的材料要易于消毒处理。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料以免碰碎。如果路程较远或气候炎热应在2－8℃条件下运送。用于抗体检测的样品可在短期内(48小时)室温递送。每一包装的体积不得超过50ml。运送感染性材料必须有记录。 3.3 如需对个别样品进行复测可以用特快专递形式投寄但必须将盛样品的试管包扎好避免使用玻璃容器以保证不会破碎和溢漏。 4 样品的接收 4.1 含有感染性样品的包果必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开用后的包裹应进行消毒。 4.2 核对标本与送检单检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒同时还要报告有关领导和专家。 4.3 检查样品的状况记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄症等情况。 原理 3. 材料：HIV(1/2)抗体诊断试剂盒HIV(1/2)抗体诊断试剂盒检测的需要。 HIV(1/2)抗体检测ELISA双抗原夹心法 （中山试剂） 1. 目的：初步筛查HIV感染。 2. 原理 3. 材料：HIV(1/2)抗体诊断试剂盒HIV(1/2)抗体诊断试剂盒检测的需要。 HIV(1/2)抗体检测金标法 (中山生物) 1. 目的：初步筛查HIV感染 2. 原理金标法是在酶联免疫吸附法的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定新技术。其检测原理是,以微孔滤膜为载体,包被已知抗原,加入待检标本后,经滤膜的毛细管作用,标本中的抗体与胶体金结合的抗原结合,再通过与膜上包被的抗原结合显色而