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自由基(英语：Free Radical)，又称游离基，是指化合物的分子在光热等外界条件下，共价键发生均裂而形成的具有不成对电子的原子或基团。 辅因子（Cofactor）是指与酶（酵素）结合且在催化反应中必要的非蛋白质化合物。某些分子如水合部分常见的离子所扮演的角色和辅因子相当类似，但由于含量不受限制且普遍存在，因此不归类为辅因子。　 　单链结合蛋白（SSB，single-strand binding protein）:一种与单链DNA结合紧密的蛋白质，它的结合可以防止复制叉处的单链DNA本身重新折叠回双链区。 外水体积（Vo）是指凝胶柱中凝胶颗粒周围空间的体积内水体积（Vi）是指凝胶颗粒中孔穴的体积。柱床体积 是（Vt）凝胶柱所能容纳的总体积。 Kav分配系数?表示某个组分在内水体积和在外水体积中的浓度分配关系。 Kav值的大小和凝胶柱床的总体积（Vt）、外水体积（Vo）以及分离物本身的洗脱体积（Ve）有关。 通过将一些已知分子质量的标准蛋白质在同一凝胶柱上以相同条件进行洗脱，分别测定Ve 或Kav，并根据上述的线性关系绘出标准曲线，然后在相同条件下测定未知样品的Ve 或Kav，通过标准曲线即可求出其分子质量。 　1.血糖来源 　　（1）糖类消化吸收：食物中的糖类消化吸收入血，这是血糖最主要的来源。 　　（2）肝糖原分解：短期饥饿后，肝中储存的糖原分解成葡萄糖进入血液， 　　（3）糖异生作用：在较长时间饥饿后，氨基酸、甘油等非糖物质在肝内合成葡萄糖。 　　（4）其他单糖的转化。 　　2.血糖去路 　　（1）氧化分解：葡萄糖在组织细胞中通过有氧氧化和无氧酵解产生ATP，为细胞代谢供给能量，此为血糖的主要去路。 　　（2）合成糖原：进食后，肝和肌肉等组织将葡萄糖合成糖原以储存。 　　（3）转化成非糖物质：转化为甘油、脂肪酸以合成脂肪；转化为氨基酸以合成蛋白质。 　　（4）转变成其他糖或糖衍生物，如核糖、脱氧核糖、氨基多糖等。 　　（5）血糖浓度高于肾阈（8.9～9.9mmol／L，160～180mg／dl）时可随尿排出一部分。 )蛋白质二级结构的基本形式：蛋白质的肽链局部盘曲、折叠的主要有α-螺旋、β-折叠、β-转角和不规则卷曲等几种形式。 α-螺旋：肽链的某段局部盘曲成螺旋形结构，称为α-螺旋(图12)。 α-螺旋的特征是：①—般为右手螺旋；②每螺旋圈包含3.6个氨基酸残基，每个残基跨距为0.15nm，螺旋上升1圈的距离(螺距)为3.6×0.15=0.54nm； = 3 \* GB3 ③螺旋圈之间通过肽键上的C＝O和-NH-间形成氢键以保持螺旋结构的稳定；④影响α-螺旋形成的主要因素是氨基酸侧链的大小、形状及所带电荷等性质。 2)β-折叠：为—种比较伸展、呈锯齿状的肽链结构。两段以上的β-折叠结构平行排布并以氢键相连所形成的结构称为β-片层或β-折叠层。β-片层可分顺向平行(肽链的走向相同，即N、C端的方向一致)和逆向平行(两肽段走向相反)结构。　　　　　 3) β-转角：此种结构指多肽链中出现的一种180°的转折。β-转角通常由4个氨基酸残基构成，由第1个残基的C＝O与第4个残基的-NH-形成氢键，以维持转折结构的稳定。　　4)不规则卷曲：此种结构为多肽链中除以上几种比较规则的构象外，多肽链中其余规则性不强的—些区段的构象。 　各种蛋白质依其一级结构特点在其多肽链的不同区段可形成不同的二级结构。如蜘蛛网丝蛋白中有很多α-螺旋及β-折叠层，也有β-转角和不规则卷曲。 从分子水平上研究生物之间的亲缘关系，一般有两种方法： 一是比较不同种生物的___蛋白质组成 ______差异，常用测定蛋白质中___氨基酸序列______的方法；二是比较不同物种的遗传信息差异，常用__ DNA分子 ____杂交的方法；将两个物种的___ DNA双链______杂交，形成杂合双链的部位越多，两个物种间的亲缘关系就___近______。 酶是一种特殊的蛋白质 在分离纯化过程中需要注意温度以及PH值等的控制 注意在纯化过程中所使用的缓冲溶液的离子强度的控制常用PBS缓冲溶液 在实际纯化过程中 一般要在低温冰箱中进行 缓冲溶液中注意加入EDTA二钠盐1-5mM 螯和重金属离子一般避免酶失活。常用分离步骤包括分子筛层析、离子交换、疏水层析等步骤。由于酶很不稳定 再提取时容易变性失活 因而提取时应注意温度 整个提纯操作应尽可能在低温下0~4°C进行 以防止酶的变性或者蛋白质水解酶对目的酶的水解。还要注意PH的控制,在提纯过程中一般采用缓冲液作为溶剂 防止过酸或者过碱。其次还有盐浓度 因为大多数蛋白质具有盐溶性质 所以在抽取过程中可选用合适浓度的盐浓液以促进蛋白质溶解。之后还要注意液体的搅拌 剧烈搅拌容易引起蛋白质变性 提纯应该避免剧