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Click XIon 氨基糖苷类抗生素分离 背景 氨基糖苷类抗生素是由氨基糖（单糖或双糖）与氨基环醇形成的一类抗生素， 抗菌谱广、对需氧革兰氏阴性菌抗菌活性强。根据环醇上取代基类型或位置不同 可细分为多种化合物，常见的氨基糖苷类抗生素有：链霉素、庆大霉素、妥布 霉素、卡那霉素、巴龙霉素、阿米卡星、奈替米星等。由于其具有抗菌谱广、价 格便宜的特点，且能促进动物生长，因此该类抗生素被广泛应用于兽药和家畜饲 养；其中，庆大霉素、卡那霉素、链霉素和二氢链霉素是目前兽药和饲料添加剂 使用最为广泛的四种氨基糖苷类抗生素。鉴于该类抗生素在临床应用中表现出显 著的副作用和细菌容易产生耐药性，欧盟明确规定禁止使用氨基糖苷类抗生素作 为家畜的生长促进剂；美国 FDA 和我国相关部门也对食品中氨基糖苷残留问题 极为关注。 氨基糖苷类抗生素分子结构中含有氨基、羟基等极性基团，多属于强极性化 合物，其在传统的反相液相色谱（RP-HPLC）模式下保留很弱，难以实现有效的 分离分析。通常的解决方案是在流动相中加入离子对试剂与目标抗生素分子结合 以增强保留。该方法虽然可解决保留弱的问题，但衍生出的新问题是流动相与后 续质谱检测器不兼容。由于氨基糖苷类抗生素具有强亲水性的特点，亲水作用色 谱（HILIC）方法是用于其分离分析的理想技术手段。但是，常用的亲水作用色谱 柱及其色谱方法在氨基糖苷的分离中都不同程度的表现出选择性不足和峰形拖 尾等问题，尤其是选择性不足的问题十分突出。依托在亲水作用色谱分离材料和 方法开发领域的积累和优势，华谱依靠提高亲水色谱材料的表面亲水性和调控 表面静电效应，推出基于Click XIon 色谱柱的氨基糖苷类抗生素色谱分离方法。 目标 1. 氨基糖苷类抗生素色谱分离方法开发。 2. 使用 Click XIon 色谱柱在亲水色谱模式下实现氨基糖苷类抗生素的高选择性 分离。 实验和结论 储备溶液：大观霉素、二氢链霉素、链霉素、庆大霉素、卡那霉素、巴龙霉素、 妥布霉素、新霉素储备液（5 mg/mL，溶于水）。 混标溶液：取大观霉素、二氢链霉素、链霉素、卡那霉素、巴龙霉素、妥布霉 素各100 μL，取庆大霉素、新霉素各200 μL，混匀。加入250 μL 水，1.2 mL 乙 腈，100 μL 250 mM NH FA, pH2.98 。样品中含10 mM 铵盐，约50%乙腈，其中大 4 观霉素、二氢链霉素、链霉素、卡那霉素、巴龙霉素、妥布霉素浓度为0.2 mg/mL， 庆大霉素、新霉素浓度为0.4 mg/mL 。 色谱条件： 色 谱 柱：Click XIon (4.6×150 mm, 5 μm, 100 Å) 流 动 相：A:铵盐缓冲溶液; B: 乙腈 梯 度：0 - 20 min, 60 - 10% B 流 速：1 mL/min 柱 温：30 oC 进样体积：10 μL ELSD 参数：增益：50 ；气体压力：30 psi；喷雾器：70%；漂移管：75 oC 30 12 25 20 9 15 U S 2 L 1 10 7 10 3 5