L-谷氨酰胺高产菌株的定向选育及产胺条件的研究.pdf

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’( )! 0’ )# 年 月 $$ % !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,+-.+/ $$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! !谷氨酰胺高产菌株的定向选育及产胺条件的研究 % % 3 汪世华 白文钊 吴思方 张先恩 % （湖北工学院生物工程系 武汉 !3$$#A） （陕西理工学院生物系 汉中 3$$%） 3 中国科学院武汉病毒研究所 武汉 ） （ !3$$% 关键词：谷氨酰胺，诱变育种，发酵 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） B@@# 2 $$$%5#$1 $$ $#5$@%5$! 谷氨酰胺（ ）是 谷氨酸 羧基酰胺化的一种氨基酸，其结构式为 — — — C%= D5 5 0E FG GE GE ! GE GFFE。它具有许多特殊的功能，科学家将其归类为条件必需氨基酸。当肌体生病时应补充更多的 谷氨酰胺。尤其在治疗胃溃疡、十二指肠溃疡上有独特的疗效，也是一种很有发展前途的新药。但长期 以来，药用谷氨酰胺一直处于紧缺状态，一方面由于难以找到高产且性能稳定的生产菌株，另一方面几 ［，］ 乎都是在放大试验上遇到了困难% 。 发酵液中谷氨酰胺的积累涉及到 途径、 循环、谷氨酸的酰胺化和能量代谢，单一改造某一 4HI JG2 代谢步序很难解决问题，而改造过多易对代谢形成负作用。诱变仍是一种简便有效的方法，结合抗性筛 选易于得到目的菌株。我们采用 射线 硫酸二乙酯 射线进行复合诱变，并结合磺胺胍抗性（未见相 5 5 5 5 ! ! 同报道）得到一株高产菌株KE!! ，产胺水平高且稳定性好。同时我们采用三角瓶5%@D 全自动发酵罐（便 于参数控制） 发酵罐 中试的逐步放大方法，而不是从小试直接到中试的方法，从而解决了发酵罐 5%$$D 5 难以放大的问题。本文报道了对该菌株的筛选和发酵条件的研究。 # 材料和方法 #$ # 菌种 谷氨酸棒杆菌（ ） ，由武汉味精厂提供。 !#$%’()*#+,- ./,*(-+),- K1%%! #$% 试剂 谷氨酰胺标准品为政翔化学试剂研究所产品，玉米浆由武汉味精厂提供，磺胺胍（ ）为美国 D5 KC K7L-6 公司产品，硫酸二乙酯（ ）为上海硫酸厂双流工贸公司产品。