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* * * * * * * 第六章 实验中医学常用的 实验研究方法 及其在中医研究中的应用 许多初涉中医实验研究的人，最大的问题是不知道如何着手研究，不知道观察什么指标。 比如，发现某张中药复方治疗肿瘤，比如肝癌，有效，打算开展实验验证其疗效，揭示其作用机制，怎么办？从何入手？ 你们说怎么办？如何开展研究，实施具体步骤？ 本章介绍实验中医学的常用实验方法和技术，以及应用这些方法研究中医的典型范例。 希望通过集中对常用具体实验方法的介绍，让大家了解不同学科主要方法、异同，各自的特点和优势，以及相互间的联系，学会如何根据需要选择不同的方法或不同方法的组合。 各节中的研究现状和范例，希望对如何应用具体某一实验手段研究中医有比较具体的认识，通过典型范例的介绍分析，使这种认识更加深化。 在实验研究中可以观察许多方面，看看中药治疗后在哪些方面起作用。其中形态学是最常用的观察手段。即使在分子生物学迅速发展的今天，也是如此。有许多优点，实在。比如中药的药效学实验、毒理实验、质量检测等往往采用这些实验。 形态学方法大体有3个层次：大体解剖、光镜、电镜。 大体解剖：肉眼所见，最为基本。如果肿瘤体积在用了中药后，没有减小，再什么先进的研究也没有必要。临床所见也大体如此，比如咳嗽好了没有，骨头接上了没有。这些最基本。 但是，想深入细致地看，难。肉眼能力的局限。放大镜放大的倍数仅若干倍。所以就必须借助光镜和电镜。 光镜：通常可以放大100-400倍（范围在50-1600倍）。由于放大，所以要求组织经过处理，最常见的是石蜡包埋、切片、染色。 电镜：通常可以放大500-10000倍。由于放大倍数太大，石蜡切片还不能满足，所以要求特殊的包埋、切片、染色技术。 第六章 第一节 解剖学方法及其 在中医研究中的应用 ? 解剖学是一门研究机体形态结构的重要医学基础学科，属于生物学中的形态学范畴。根据其研究对象及研究方法的不同，可分为大体解剖学、组织学和胚胎学三部分。 大体解剖学是指用刀剖割，用肉眼观察机体各器官的形态结构的科学，根据具体研究方法和观察内容的不同，又将其进一步分为系统解剖学和局部解剖学。 系统解剖学主要按照机体各系统来叙述各器官的形态结构。 局部解剖学是按照机体自然分区如头、颈、胸、腹、四肢等叙述各器官结构的层次排列、毗邻关系、血液供应、神经支配、体表标志和体表投影。 （第2-3段讲解剖学发展史，建议自学。） 大体解剖学在医学中占有极其重要的地位。 大体解剖学不仅是一门重要的医学基础学科，是学习其他基础医学和临床医学课程的基础，同时也是研究其他生命科学不可或缺的一种重要的手段。 虽然，解剖学是一门经典的学科，但是在今天医学实验中还一直在运用，不仅在医学基础、临床医学，就是在实验医学，这样的技术也十分重要。 学生在教学实验中，往往表现出对实验动物的脏器结构位置不清楚，找不到胃；解剖手法不对，损伤组织结构；技术不熟练等等。 一、大体解剖学的主要方法 1．标本防腐固定方法 标本防腐固定剂常用者为10％左右的福尔马林（甲醛）。常用的防腐固定方法是先灌注，后浸泡。 在动物实验中，有时为了保证组织的新鲜，也采取类似方法。比如，将小鼠等实验动物麻醉，开胸，左心室插入针头，缓慢注入固定液，同时切开右心房，让血液和固定液流出，待动物组织变硬后（当然得参照具体实验方法），终止固定，取材。 请注意，临床中常用的是手术和尸检。实验动物取材，往往也是非固定的，因此在熟悉固定后人体或动物组织间的位置、关系后，成竹于胸，是很重要的。 二、用大体解剖学方法研究中医的现状 教材主要涉及： 1．中医藏象理论的研究 第一段，介绍了中医最早的解剖纪录，这有力地推动了中医理论和临床的发展。 教材以下谈到： 有人把中医肝藏与平滑肌的生理解剖进行比较，认为肝藏生理功能的主要物质基础是人体平滑肌系统。依据：（1）肝属木，血管、淋巴管、支气管平滑肌等均显示出“木”的结构特征；（2）肝体阴而用阳，主升主动，而平滑肌系统正是人体最大的内脏运动体系；（3）肝贮藏血液和调节血量（主疏泄）的物质基础是血管平滑肌；（4）血管平滑肌异常收缩，形成高血压，即中医的肝阳上亢证；（5）肝胆相表里，胆是一个平滑肌器官；（6）目中之风轮即黑睛由肝所主，黑睛正是平滑肌群。（7）肝经药物的药理效应往往直接或通过植物神经或更高级中枢神经系统影响平滑肌，如柴胡利胆、天麻扩张小血管等。 意义如何？ 三焦的本质。如张锡纯、谢利恒等认为三焦是网膜；章太炎、陆渊雷认为三焦是淋巴系统；李抑衡认为三焦是消化系统，主要指胃、小肠、大肠，其生理功能还涉及循环及排泄系统；李聪甫认为三焦走胸腹腔全部；刘继安认为三焦为胸膜、腹膜；曾羡忠、赵守勋认为三焦是植物神经系统；赵意兰认为三焦是与交感神经相互联络的脊神经