农业微生物学试验试验一细菌革兰氏染色法.pptVIP

农业微生物学实验 微生物教研室 2010秋季学期 植物生产类各专业 实验内容 实验一 细菌革兰氏染色法 实验二 培养基的制备及灭菌 实验三 稀释平板分离计数法 实验四 微生物菌落特征观察及描述 实验报告书写和实验要求 1 一个实验技术内容写一份报告。 2 实验内容包括实验目的、原理、操作步骤及实验结果，强调的是不能将书本上的搬到实验报告中，必须是你真实完成的步骤及对应每步的结果反映在你的报告中。 3 要求绘图时必须用铅笔描绘，用一个圆表示从显微镜看到的视野，标明菌名、放大倍数等。 大肠杆菌 10×100 4 实验结束后要求每位同学将自己使用过的仪器和玻璃器皿打扫干净，并放回原处，保持实验室整洁，每次实验全班留一组同学打扫实验室卫生。 农业微生物学实验 实验一 细菌革兰氏染色法 1．本实验的目的和要求 了解革兰氏染色的原理，学习并掌握革兰氏染色的方法。 2．实验内容和原理 革兰氏染色法（Gram stain）不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的 ，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。 3．需用的仪器和试剂等 大肠杆菌，枯草芽孢杆菌；革兰氏染色液，载玻片，接种环、显微镜等。 4．实验步骤 样品涂片——干燥——固定——草酸铵结晶紫初染约1min——水洗——碘液媒染约1min——水洗——95％酒精脱色20―30s——立即水洗——番红液复染1―2min——水洗——干燥——镜检 * * * * 5．实验报告要求 在你所作的革兰氏染色制片中，大肠杆菌和枯草芽孢杆菌各染成什么颜色？它们是革兰氏阴性菌还是革兰氏阳性菌？ 绘图。