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甲磺隆人工抗原的合成及多克隆抗体的制备.PDF
第29卷第3期 南京工业大学学报 V01．29No．3 2007年5月 0F Mav2007 JOURNALNANJINGUNIVERSITYOFTECHNOLOGY 甲磺隆人工抗原的合成及多克隆抗体的制备 戴烨，李方实，孙 峰 (南京工业大学理学院，江苏南京210009) 摘要：为了建立测定磺酰脲除草剂甲磺隆残留的酶联免疫吸附检测方法(ELIsA)，以邻甲酸甲酯苯磺酰胺与琥 珀酸酐反应合成半抗原l_[(2一甲酸甲酯)苯磺酰]单胺琥珀酸．用活性酯化法将半抗原分别与牛血清蛋白(BsA) 和卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原和包被抗原．通过免疫抗原免疫新西兰大白兔获得甲磺隆的多克隆抗体，抗 体效价达800 000．以此抗体建立的间接竞争ELIsA法，检测甲磺隆的线性范围在0．7～40m∥L，最低检测限为 0．16 m∥L．与甲磺隆结构相似的磺酰脲类除草剂的交叉反应结果表明，氯嘧磺隆的交叉反应率为38．2％，其他4 种除草剂的交叉反应率都小于1％． 关键词：甲磺隆；半抗原；人工抗原；多克隆抗体；酶联免疫吸附法 中图分类号：x132 文献标识码：A 文章编号：1671—7627(2007)03—0039—05 ofarti6cial for and Synthesis antigenmetsulfuron-methyl of preparationpolyclonalantibody DAI Ye，LI Fang—shi，SUNFeng of of (CoUegeSciences，NanjinguniversityTechnology，Nanjing210009，China) ordertoestablisha 1inkedimmunosorbent the her- Abstract：In competitiveenzyme assay(ELISA)forsulfonylurea bicideresidualof infoodand metsulfumn-methylenvironment，ahapten， 1一[(2一methylester) monoamidosuccinic withsuccinicacid．The acid，wassynthesized using2．carbomethoxybenzenesulfonamidehapten was tocarrier BSAand0VAtheactivatedestermethod． coupledrespectiVelyproteins by Polyclonalantibody wasraisedintwoNewZealandwhiterabbits．Thetitersoftheantiselllmreached againstmetsulfuron．methvl 800000． the asthe theindire
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