一株具有抗HepG2活性的胡桃楸内生真菌的.PDFVIP

第３４卷第１３期 Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１３ ２００９年７月 　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　　 Ｊｕｌｙ，２００９ ·研究论文 · 一株具有抗 ＨｅｐＧ２活性的胡桃楸内生真菌的 分离及研究 １ １ ２ １ １ １ 李美芽 ，吴运帷 ，蒋福升 ，于湘莉 ，唐克轩 ，苗志奇 （１．上海交通大学农业与生物学院，上海２００２４０； ２．浙江中医药大学生命科学学院，浙江杭州３１００５３） ［摘要］　目的：从胡桃楸树皮部分离抗癌活性菌株，筛选抗癌活性菌株，进行菌种鉴定，并对其发酵产物体外抗癌活性进 行初步研究。方法：采用菌丝顶端纯化法从胡桃楸树皮部分离、纯化抗癌活性菌株；以ＭＴＴ法对上述活性菌株发酵液体外抗 癌活性进行初步评价；形态学观察结合ＩＴＳ序列分析法对筛选出的高抗癌活性菌株进行了菌种鉴定；单独对高抗癌活性菌株 进行了体外抗癌活性试验。结果：分离得到ＦＳＮ００１～０１４共 １４株内生真菌，初步评价发现菌株 ＦＳＮ００６具有较强的抗癌活 性，鉴定为半知菌亚门，丝孢纲，丛梗孢目，木霉菌属长枝木霉。ＭＴＴ结果显示ＦＳＮ００６发酵液对人肝癌ＨｅｐＧ２细胞具有明显 －１ 的生长抑制作用，在稀释２０倍后仍能达到半数抑制效果。同等条件下阳性对照药姜黄素的ＩＣ为１１４９ｍｇ·Ｌ 。同时发酵 ５０ 液对正常肝细胞ＨＬ７７０２的抑制程度仅相当于癌细胞抑制率的１／４左右，表现出较好的癌细胞选择性，有望开发成一种水溶 性的高效低毒的抗癌药物。结论：胡桃楸树皮部存在多种内生真菌，其中分离得到的一个菌株具有较强的抗癌活性；其抗癌 活性成分及其是否与胡桃楸中抗癌活性物质存在相关性等问题有待进一步深入研究。 ［关键词］　胡桃楸；内生真菌；发酵液；抗肿瘤 　　植物内生真菌（ｅｎｄｏｐｈｙｔｅ）是指其生活史的某 速，容易培养，易于控制，生物量大，不受季节、 一段时期生活在植物组织内，对植物组织没有引起 气候、地域等自然条件限制，且发酵成本低，易于 明显病害症状的真菌，包括那些在其生活史的某一 通过现代生物技术等改造遗传形状等优点，人们把 阶段营表生的腐生菌，对宿主暂时没有伤害的潜伏 目光转向从药用植物中分离内生真菌研究，以期获 ［１］ 性病原菌和菌根菌 。其中，某些内生真菌长期 得产药用物质的内生真菌。这类内生真菌将是一种 生活在植物体内的特殊环境中，与宿主协同进 很有潜力的药物来源。 ［２］ 化 ，与宿主共同进化的内生真菌可能从宿主获 胡桃楸ＪｕｇｌａｎｓｍａｎｄｓｈｕｒｉｃａＭａｘｉｍ是胡桃科胡 得相关基因的直接传递，具有与宿主相同的次生代 桃属的落叶乔木，主要分布于我国黑龙江省东部小 ［３］ 谢产物合成途径 。我国是药用植物大国，资源 兴安岭、完达山以及张广才岭等山区，为我国珍贵树 丰富，有记载的药用植物 １１０２０种，隶属２３１３ ［５］ 种之一 。楸树中含有丰富的环烯醚萜类化合物， ［４］ 属，３８３科，约占药用资源总数的８７％ 。但目前 不仅有利尿、降血糖作用，还有抗炎、抗氧化、神经保 绝大多数药用资源来自野生，考虑到植物内生真菌 ［６