红细胞血型系统【PPT】.ppt

交叉配血(Matchcross Blood) 二）次侧不合：Pc+Ds 1.Pc做DAT：阳性见于自身抗体，输血反应，HDN 2.Ds中有不规则抗体 3.忽略ABO亚型误定血型 4.冷凝集素吸附于Pc 5.异型输血A,B AB, O AB,A,B 使用时，直接删除本页！ 精品课件，你值得拥有！ 精品课件，你值得拥有！ 使用时，直接删除本页！ 精品课件，你值得拥有！ 精品课件，你值得拥有！ 四，交叉配血的注意事项 1.时间与速度 2.水温箱的温度 3.水质 4.用新鲜的标本 5.做抗人球实验时最好用血清 6.注意输血史，妊娠史 7.注意溶血的结果 原理 蛋白水解酶，作用于红细胞表面的多糖链，切断带有负电荷的羧基集团的唾液酸，减少红细胞表面负电荷，缩短红细胞之间的距离。 分类 一步法 二步法 三、微柱凝胶免疫实验 (Microcolumn gel immuno-assay MGIA) MGIA本质：是血凝实验，即红细胞抗原抗体在微柱腔内的凝胶介质中发生肉眼可见的凝聚反应。 抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合的产物。通过调节葡聚糖凝胶的浓度来控制分子筛孔径大小，使分子筛只允许游离红细胞通过，从而达到分离凝集红细胞和游离红细胞的目的。 卡式检测法（微柱凝胶试验） 法国Dr. Yves Lapierre在1990年首先发明的一项免疫学检测新技术，是微柱凝胶技术与以上所有实验技术相结合的产物。1994年此项技术获得了美国FDA（Food and Drug Administration ）的认可。经过不断改进和临床大量应用，目前，在多数发达国家，此项技术已作为常规的红细胞血型血清学检测技术应用于临床。 工作原理 微柱：柱体上端、柱体 过滤介质：颗粒直径26-103 nm的葡聚糖凝胶，凝胶间缝隙只允许游离红细胞通过 缓冲液：低离子介质（加或不加抗血清） 工作原理 红细胞和抗血清加在凝胶上部,反应、低速离心后观察 凝集的红细胞，被阻挡在小柱中凝胶的上部或中央，证明发生凝集反应，判断凝集反应阳性 游离的红细胞，被挤过装有过滤介质的小柱，而到达小柱的底部，证明未发生凝集，判断凝集反应阴性 微柱凝集试验技术分类 中性胶 特异性胶：含有特意性抗体 抗球蛋白胶：抗球蛋白胶，可进行IgG类抗体的检测 结果判读模式 4+：红细胞复合物位于胶表面。 3+：大部份红细胞复合物位于胶表面，小部分位于胶中上部。 2+：大小部分位于胶中部，小部分位于胶中上部。 1+：复合物位于胶中近底部。 +/-：与阴性管结果对照，如有差别，即可判断。 d.p.：对某特异性抗体，同时存在阴性与阳性细胞，而发生混合反应。 Hemo.：溶血反应。 -：离心后红细胞沉积在微柱凝胶管底部。 微柱凝胶免疫实验的特点 灵敏度和准确性高，重复性好 简便，不需要清洗红细胞 标本用量少 有利于新生儿等标本检测 实验全过程标准化 标准化的孵育时间、离心时间以及结果判读 消除了主观因素对弱反应结果的判读，减少了人为错误的发生 实验结果客观性强，而且稳定，可以长期保存 微柱凝胶免疫实验临床应用 红细胞血型鉴定 交叉配血 抗体筛查 新生儿溶血病的检测 四、抗人球蛋白试验（antihuman globulin test，AGT）（Coombs试验） 原 理 抗人球蛋白试验，又称 Coombs 试验，是检查不完全抗体的 一种方法。用人血清免疫家兔，产生抗人球蛋白抗体，即抗抗体。将抗人球蛋白抗体（抗抗体） 加入已经致敏的红细胞盐水悬液中，红细胞表面的不完全抗体Fc段与抗人球蛋白抗体的Fab段发生特异性结合，使红细胞发生凝集。本试验可分为直接抗人球蛋白试验和间接抗人球蛋白试验 直接抗人球蛋白试验(direct antiglobulin test，DAT ) 检测红细胞是否在人体内被不完全抗体致敏的试验。 间接抗人球蛋白试验(indirect antiglobulin test，IAT ) 间接抗球蛋白试验是一种检测血清中不完全血型抗体的方法。即用已知抗原的红细胞测定受检 血清中相应的不完全抗体，或用已知抗血清测定受检红细胞上相应抗原。 IAT的临床应用 红细胞血型定型 用已知特异性的不完全抗体与被检红细胞孵育，洗涤后加入抗人球蛋白试剂，可鉴定该红细胞血型。 对输血前患者、新生儿不完全抗体的筛查与鉴定 用已知血型抗原的红细胞和被测血清孵育，可鉴定血清中的不完全抗体。 抗体效价的检测 将倍比稀释的血清加入已知血型抗原的红细胞中，孵育后加入抗人球蛋白试剂，可测定血清中不完全抗体的效价。 相容性配血 DAT的临床应用 新生儿溶血病（HDN）的诊断 母体的IgG抗体穿过胎盘结合到胎儿红细胞 免疫溶血性输血反应患