植物多酚分离提取方法和生物功能研究进展.docVIP

   1 前言 松树皮中提取的多酚物质，作为功能性食品已在美 国和日本市场推广：在日本市场上可以看到有乌龙 茶、苹果、葡萄籽等多种类型的多酚产品；尼柯维 斯基公司成功开发并推出了以“苹果酚”命名的苹 果多酚产品，并广泛应用于胶姆糖、糖果、甜点、 饮料等原料，且市场迅速发展扩大。在我国已深入 研究的有茶多酚、葡萄籽多酚、烟草多酚等，并且 对于多酚的多种功效已被广泛接受和证实。近年 来，以橄榄多酚为主的其他多种植物多域，且大量 产品相继推出市场深获认可与好评。 植物多酚（Plant Polyphenols）是一大类广泛存 在于植物体内的复杂多元酚类化合物。主要存在于 植物的皮、根、木、叶、果中[1]。狭义认为植物多 酚是单宁(Tannin s)或鞣质，其分子量在500～3000 之间；广义上，还包括小分子酚类化合物，如花青 素、儿茶素、栎精、没食子酸、鞣花酸、熊果苷等 天然酚类。许多植物或水果如茶叶、葡萄、苹果、 柑橘、樱桃、桃、李、杏、醋栗等都含有一定量的 多酚物质。这些多酚物质大体上可分为简单酚类、 酚酸类、羟基肉桂酸类和黄酮类化合物等。其中， 简单酚类物质含量较少，主要包括儿茶酚、对苯二 酚、间苯二酚等。 最初人类对酚类物质的有意识的利用是将其 用来制革。随着科技发展，特别是20世纪50年代以 后，随着植物多酚与蛋白质、多糖、生物或微生物 酶、金属离子的反应活性及抗氧化、捕捉自由基、 衍生化反应等一系列化学行为被初步揭示，使人们 看到了这类天然产物的应用前景。因此植物多酚的 2 多酚的分离和纯化 2.1溶剂萃取分离 利用溶剂的极性，对多酚进行萃取分离，是较 为常用的方法之一。根据溶剂分类包括液态溶剂萃 取和超临界萃取两种。 2.1.1 液体溶剂萃取 根据试验中的处理作用分为浸提溶剂和纯化萃 取两种。前者是利用茶多酚在不同溶剂中的溶解度 控制。此外，有些金属盐残留对产品安全性也构成 隐患。但分离纯化工艺中，为了更好达到更好的分 离效果，它又是很必要的，选择恰当的沉淀剂和适 当的浓度可有效提高分离纯化得率。纯化植物多酚 的工艺流程大多为：植物多酚粗提液→盐析→过滤 →(滤液)乙酸乙酯萃取回收→浓缩→干燥→成品。严 明潮等[17]在茶多酚的分离实验中得出：在乙酸乙酯 萃取前，对茶汤做盐析处理，可对儿茶素的化学组 成产生影响。在较低盐浓度(5%)时，盐浓度的提高 与脂溶性儿茶素及儿茶素总量呈正比。数据显示： 以适当浓度盐析处理后比未经处理的茶多酚得率提 高69%，而过高浓度则会降低提取效果。 唐德松，沈生荣等[18]，将粗制植物多酚溶于未 饱和的食盐水中，除去沉淀，然后加食盐析出植物 多酚类物质，再用乙醚抽提，冷冻干燥可制成纯 品。该法的优点是在一定浓度范围内可提高植物多 酚的含量，改善制品的色泽；缺点是盐析不能达到 很好的纯化效果。 此外，较低盐析浓度(5%)还能明显改善制品的 色泽，这可能是盐析对茶汤中的色素、果胶多糖等 配于盐水下相中，从而在提取的同时实现了植物多酚 与某些无效成分的分离，有效提高了产物的纯度。同 时，植物多酚产物转移至丙醇上相，可改变提取过程 中的化学平衡，有利于植物多酚的溶出。 数据结果显示，双水相提取法条件为：丙醇 体积分数60%，硫酸铵用量0.30 g/m l，超声时间 20 m i n ，料液比0.033 g /m l；结果：多酚得率为 1.83%，多酚含量为24.1%。 乙醇-水回流提取法条件为：乙醇体积分数 60%，回流时间2 h，料液比0.033 g/m l；结果：多酚 得率1.81%，多酚含量15.1%。多酚含量比回流提取 虽好，但是仍然不够理想，得率也很低，不适于多 酚提取的应用。 分析此法之所以应用很少，可能是与其他色谱 分离、盐析等方法比较，其得率较低之由。不过随 着科技不断进步，各个领域结合的不断拓展，相信 亦能得到更好的发展。 2.4 层析法 层析法亦称色谱法，原理是基于样品组分在两 相之间的分配系数不同而分离。根据分离原理可分 食植物所含化合物对肿瘤发生的特定阶段具有干预 和阻断作用。 2001年，Iwasea[35]等研究了黄酮类衍生物对埃- 巴二氏病毒(Epstein Barrvirus)早期抗原激活的抑制作 用。在试验的化合物中槲皮酮五烯丙基醚对小鼠皮 肤癌的发生有明显的抑制作用，质量浓度为9m g/m L 的槲皮酮，能将由亚硝基二乙胺诱导的小鼠肺癌的 发生率从76.4％降低到44.4％。 Caderni等[36]对比研究了红葡萄酒提取物P A和 绿茶提取物对结肠癌的预防作用，用氧偶氮甲烷 (azoxymethane，AOM) 7.4 mg/kg给雄性F344大鼠皮下 注射10次，诱发结肠癌，实验组分别喂饲红葡萄酒 提取物、绿茶提取物50 m g