第七章节反胶团萃取课件(1683KB).ppt

四、反胶团萃取用于蛋白质的复性 反胶团萃取的另一个应用是蛋白质的复性。 重组DNA技术生产的大部分蛋白质，须溶于强变性剂中，以便从细胞中抽提出来。除去变性剂，进行复性的过程通常要在极稀的溶液中进行，以避免部分复性中间体的凝集。 利用反胶团包裹变性的蛋白质，通过调整系统组成的环境参数，使得每个微胶团只包裹一个蛋白质分子，然后改变胶团溶液组成进行复性，由于蛋白质被单独装在各个胶团中，复性时完全不接触，避免了有害作用，使酶的活性完全恢复。 五、从植物中提取油和蛋白质 用烃类有机溶剂对植物种子进行反胶团萃取，油被直接萃入有机相，蛋白质却萃入反胶团的“水池”中。 先用水溶液反萃取得到蛋白质，溶液再经冷却使表面活性剂沉淀分离，最后用蒸馏的方法将油和烃类分离。 实验证明该方法相当优越。 六、分离膜型的反胶团萃取 分离膜型的液-液反胶团萃取是混合分离型的改进型，以疏水性多孔质膜（接触比表面积较大，30~300cm2/cm3)作为液液两相的接触界面。 在膜的内外两侧，分别流过含有蛋白质的水相和含有反胶团的有机相，液液界面靠膜两侧的压力差保持。 因膜自身对蛋白质透过无选择性，与反胶团萃取分离法具有相同的原理。 其优点是： 没有在一般连续性液液萃取法中成为问题的进料和液泛等制约因素，可自由地改变液流的流速； 总物质移动速度和膜面积比一般方法大； 在原理上是连续式的，放大也较容易。 第五节 在液膜分离法中的应用 利用含有反胶团的有机相作为液膜，从一水相中向另一水相中选择性地输送生理活性物质的液膜分离方法，和通常的液液萃取法相比，具有以下一些特征： 正萃取和反萃取能同时在一个装置内进行，表面活性剂的使用量及其损失较少，从原理上来看，速度差分离也是可能的。 第六节 反胶团萃取设备 要实现反胶团萃取的工业化，关键之一是开发适用于反胶团萃取的高效分离设备 1、膜萃取器 膜萃取器有管状超滤膜和中空纤维膜两种。 （1）管状超滤膜 用管状陶瓷超滤膜截留含有磷脂酶的反胶团，实现了对生物产品的部分分离。 含有磷酯酶的发酵液经过泵进入到陶瓷超滤膜组件中，磷酯酶被截留在膜内，萃余相则返回到反应器，从而实现磷酯酶的分离。 （2） 中空纤维膜 中空纤维管是另一类被广泛用于液-液分离的膜萃取器。它具有很大的比表面积，且与反胶团技术相结合能减少蛋白质的失活，是一项很有实用前景的生物分离技术。 将亲和配基（活性色素辛巴蓝）加入到大豆卵磷酯-正已烷系统中，制成亲和反胶团相，并将此胶团相固定于聚丙烯中空纤维膜内，从而构建起亲和反胶团萃取膜的分配色谱装置（AMPC）。 2、离心萃取器 反胶团溶液-水-蛋白质所组成的萃取体系，由于表面活性剂的存在，界面张力低，易乳化。另外，由于萃取的目标产物是蛋白质，易变性失活。为了尽量避免蛋白质的变性，应尽量缩短操作时间，因而反胶团离心萃取是一项很合适的蛋白质萃取分离技术。 3、混合澄清槽 混合-澄清式萃取器是一种最常用的液-液萃取设备，该设备由料液与萃取剂的混合器和用于两相分离的澄清器组成，可进行间歇或连续的液-液萃取。 但该设备最大的缺点是反胶团相与水相相混合时，混合液易出现乳化现象，从而增加了相分离时间。 4 、微分萃取设备 （1）喷淋塔萃取器 喷淋塔是一种应用广泛的液-液微分萃取设备，具有结构简单和操作弹性大等优点，在反胶团萃取方面受到了人们的关注。尤为重要的是，当用于含有表面活性剂的反胶团体系时，所需输入的能量很低，故不易乳化，从而缩短了相分离时间。但喷淋塔的缺点是连续相易出现轴向反混，从而降低萃取效率。 （2） 转盘萃取塔 转盘萃取塔（RDC）可用于蛋白质的萃取分离。 下图是RDC萃取蛋白质的示意图，反胶团相为分散相，水相为连续相。 转盘塔的优点是单位塔高的效率高、高产量、操作弹性大和低能耗等。 缺点是体系易出现乳化和返混现象。 研究转盘萃取塔中蛋白质的反胶团萃取 （1）考察d32（反胶团分散相中液滴直径）的分布。 d32随着反胶团特性的改变而改变。有溶菌酶存在时的d32比没有时要小的多。另外