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３.操作方法 (1)用镊子在粪便的不同部分，选取绿豆大小的粪块，置洁净的载玻片上涂成直径约1cm的范围。如粪便干燥，可加少量蒸馏水调和涂布。 (2)将玻片在酒精灯上缓缓通过数次，以破坏粪中的过氧化氢酶。 (3)冷后，滴加联苯胺冰醋酸液10～20滴及新鲜30％过氧化氢溶液10～20滴，用火柴棒搅动混合，将玻片置于白色背景上观察。 ４.根据颜色的出现时间，用‘‘±”、或1～3个“+”号表示结果。 ５.注意事项 (1)所用器材应清洁无血迹。 (2)一定要将粪便标本加热处理，否则可呈现假阳性。 (3)肉食动物应禁食3天肉类食物。 (4)联皋胺、过氧化氢液贮存时间过久者，不易发生颜色反应。 符号 蓝色开始出现的时间(s) 符号 蓝色开始出现的时间(s) + 60 ++ 15 + 30 +++ 3 十一、粪便中病理混杂物的观察 粪中除饲料残渣外，在病理情况下，往往混有血细胞、脓细胞、上皮细胞等物。肉食动物若发生阻塞性黄疸，还可见到大量脂肪酸；胰腺疾病时，因胰液分泌紊乱，出现大量中性脂肪。 1.粪便涂片方法 由粪便不同部分采取少许粪块，置载玻片上，加少量生理盐水，用火柴棒混合并涂成薄片，以能透过书报字迹为宜，加盖玻片，用低倍镜观察整个涂片，然后用高倍镜仔细观察。 2.观察 (1)红细胞 为小而圆、无细胞核的发亮物，常散在或与白细胞同时出现。 (2)白细胞 为圆形、有核、结构清晰的细胞，常分散存在。 (3)脓球 结构模糊不清，核隐约可见，常常聚集在一起甚至成堆存在。 (4)上皮细胞 柱状上皮细胞来自肠黏膜，扁平上皮细胞来自肛门附近。 (5)中性脂肪 镜检淡黄色折光性强，呈滴状或无色有折光块状，苏丹Ill染红色，在冷乙醇或氢氧化钠中不溶，但加热或用乙醚可溶化。 (6)游离脂肪酸 为无色细长针状结晶或块状，苏丹Ill染色块状呈红色，针状结晶不着色，加热、冷乙醇、氢氧化钠和乙醚均可使其溶化。 (7)结合脂肪酸 为针束状或块状，苏丹111染色不着色，除冷乙醇可使其溶化外，加热、氢氧化钠和乙醚都不会使其溶化。 常规检查（血常规、尿常规、粪便常规） 临床兽医学教研室内诊组 内容 实验目的与要求 1 血常规 2 尿常规 3 粪便常规 4 目的与要求 掌握血红蛋白测定、红细胞及白细胞计数的操作方法与注意事项。 掌握尿液化学检查方法。 掌握粪便酸碱度及粪便潜血检查的方法。 一、血红蛋白测定（Hb）：沙利氏法 1、原理： 盐酸与血红蛋白结合形成盐酸高铁血红蛋白而变为褐色，通过与标准比色柱比色，可测得血红蛋白的含量（g/L）。 2、试剂与设备：① 1%盐酸（白细胞稀释液）；② 沙利氏血红蛋白计。 3、方法： 将1%盐酸注入血红蛋白测定管内的刻度20%处。用沙利氏吸管精确吸取20微升血样，用脱脂棉擦去外壁附着血液后将其吹入测定管内，并反复吸吹数次，用小玻棒摇匀，静置5～10min。然后用蒸馏水稀释至测定管内颜色与标准比色柱颜色一致为止。读取液体凹面处刻度，即为100ml血液所含血红蛋白百分数或克数。  4、注意事项 ① 该法测定Hb的读数单位为g/100ml血液。 ② 用Hb吸管吸取血样前后均应及时将Hb吸管用三样瓶进行冲洗干净。 冲洗顺序为：水 酒精 乙醚 5、正常参考值 各种动物血红蛋白正常值在90～120g/L。 6．临床意义 ① 血红蛋白增多：主要是见于脱水，血红蛋白相对增加。也见于真性红细胞增多症，是一种原因不明的骨髓增生性疾病，目前认为是多能干细胞受累所致。其特点是红细胞持续性显著增多，全身总血量也增加，见于马、牛、犬和猫。 ② 血红蛋白量减少：主要见于各种贫血。 二、红细胞计数（RBC） ：显微镜计数法 1、原理 血液经200倍稀释后，充入血细胞计数板，用显微镜观察，计数一定容积内的红细胞数并换算成每升血液中的红细胞数。 2、器材与试剂 改良纽巴氏计数板、盖玻片、沙利氏吸管、5ml吸管、试管、小玻棒、显微镜、计数器、0.85%氯化钠稀释液。 3、方法 ① 用5毫升吸管准确吸稀释液2毫升于试管中，用沙利氏吸管吸取血样10微升，用脱脂棉擦去沙利氏吸管外壁多余的血液后插入试管底部，轻轻压出血液于稀释液中，再用上清液吸、吹数次，以洗出沙利氏管内黏附的血细胞，充分混匀后备用。 ② 将稀释后的血样用小玻棒取一滴，置于计数板与盖玻片交界的边缘，让其自然浸入，使稀释血样扩散入计数室内，静置2～3分钟，镜检。 ③ 计数时用低倍镜，依次计数中央大方格内的四角和正中5个中方格，共80个小方格的红细胞数。为避免重复和遗漏，计数时应按一定顺序进行。注意压在双