试验一紫外吸收光谱的绘制及有机化合物的鉴定-资料.DOCVIP

目录 实验室规则 实验一 紫外吸收光谱的绘制及药品的鉴定 实验二 荧光分光光度法测定维生素C 实验三 气象色谱内标法分析白酒中的杂质 实验四 反相高效液相色谱法分离芳烃类化合物 实验五 红外吸收光谱的测定及结构分析 实验六 原子吸收光谱测定水中镁 实验七 几种生物样品中钙、铅含量的比较测定 实验八 几种生物样品中硒含量的比较测定 附录一 附录二 附录三 实验一 紫外吸收光谱的绘制及药品的鉴定 一、实验目的与要求 学习紫外吸收光谱的绘制方法，并利用吸收光谱对药品进行鉴定； 了解溶剂的性质对吸收光谱的影响，能根据需要正确选择溶剂； 学会UV–762紫外可见分光光度计的使用。 二、实验原理 吸收光谱——以不同波长的光依次通过一定浓度的被测物质，并分别测定每个波长的吸光度。以波长λ 为横坐标，吸光度A 为纵坐标。所得到的曲线为吸收光谱。 紫外吸收光谱——指波段范围处于近紫外的吸收光谱。 分子吸收光谱的比较 紫外光谱 可见吸收光谱 红外吸收光谱 波段 远紫外 10-200nm 近紫外 200-400nm 400——800nm 0.75um—1000um 产生机理 分子吸收紫外辐射后 引起的外层电子跃迁。 电子光谱 分子吸收可见光后引起的外层电子跃迁。 电子光谱 分子吸收红外辐射后 引起的分子的振动、转动能级的跃迁 振—转光谱。 研究对象 不饱和有机物，特别是共轭体系有机物。 无机物 分子在振动过程中伴随偶极矩变化的化合物 （利用紫外光谱可对有机物进行鉴定及结构分析）。 紫外吸收光谱的特点：图形比较简单、特征性不强，当不同的分子含有相同的发色团。它们的吸收光谱的形状就大体相似，所以该法的应用有一定的局限性。 但紫外光谱对共轭体系的研究，如利用分子中共轭程度来确定未知物的结构有独特的优点。所以紫外光谱是对有机物进行定性鉴定及结构分析的一种重要辅助手段。 本实验主要是利用紫外光谱进行下列两个工作： 1．定性分析： 所采用的方法一般是标准比较法：测绘未知试样的紫外吸收光谱并同标准试样的光谱图进行比较。当浓度和溶剂相同时，如果两者的图谱相同（曲线形状。吸收峰数目、λmaa 和εmaa ）说明两者是同一化合物。 2．纯物质中杂质的检查： 一些在紫外光区无吸收的物质，如果其中有微量的对紫外光具有高吸收系数的杂质也可定量的检出。如乙醇中杂质苯的检查，纯乙醇在200-400nm 无吸收如果乙醇中含微量苯，则可测到： 200nm强吸收（ε=8000） 255nm弱吸收（ε=215。群峰）。 3．溶剂性质对吸收光谱的影响： 溶剂的极性对化合物吸收峰的波长、强度、形状以及精细结构都有影响。 极性溶剂有助于n→π* 跃迁向短波移动； π→π* 长 ； 并使谱带的精细结构完全消失，所以实验中分别以极性不同的正己烷、乙醇、水为溶剂，了解溶剂极性对吸收光谱的影响。 三、仪器与试剂 1． UV—762 紫外—可见分光光度计（带盖石英比色皿）； 2．容量瓶 若干； 3．水扬酸（ε=138） 4．无水乙醇 5．苯 6．正己烷 7．去离子水 四、实验步骤 1．仪器的基本结构（分四部分）： 光源：氢灯或氘灯。光谱范围在180—400 nm（氘灯中充以同位素代替氢，辐射强度比氢灯大4—5倍）； 单色器：作用是将连续光源分光，分离出所需的足够窄波段的光束； 吸收池； 检测器；蓝敏光电管。 2．仪器操作方法： (1) 打开外设电脑，进入桌面上的UV—8500图标，开仪器主机。（等待灯预热及仪器自检约5分钟）。计算机显示“就绪”； (2) 进入“波长扫描””OK”； (3)设置参数； (4)“启动” 计算机自动描绘出吸收曲线并给出λmax 、 A 3．试样制备及测定： 定性分析；领取未知试样的溶液，以去离子水为参比，用1cm 石英比色皿，在220—360nm 范围内测吸收光谱。 乙醇中杂质苯的检出：以纯乙醇为参比液，以含杂质乙醇为试液，在220—280nm范围测绘紫外吸收光谱。 溶剂性质对吸收光谱的影响：分别以正己烷、乙醇、水为溶剂配制水扬酸浓度为15mg·L-1溶液，以相应的溶剂作参比液，测绘各溶液在220—350nm的吸收光谱。 五、结果与讨论： 记录未知化合物的吸收光谱的条件（波段、A），确定峰值波长，并计算 εmax ,与标准图谱进行比较，确定化合物名称。 水扬酸的参数：C=15mg·L-1 A=ε·Cmol.L·Lcm λmax=231.5nm A=0.7504 ε1=8420mol-1·cm-1·L λmax=296.5nm A=0.4090 ε2=4520mol-1·cm-1·L 2.记录乙醇试样的吸收光谱及实验条件，根据吸收光谱确定是否有苯吸