课程大纲华西公共卫生学院.doc

《免疫学检验》教学大纲 卫生检验专业用 四川大学华西公共卫生学院 教研室编 (Experimental Immunology) 课程号（代码）：504083040 课程类别：专业课程 学时：48 学分：3 二、教学目的要求 是专业学生必修的考试课程。本课程通过课堂讲授、讨论、自学等方式进行教学。要求学生掌握为今后从事卫生监督工作奠定基础。在教学过程学生自、能力介绍学科发展新动。（）基本理论部分第章影响泳动度的因素电场强度pH值电渗作用其它影响因素聚丙烯酰胺凝胶的优点聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺等电聚焦电泳颗粒性原的制备可溶性抗原的制备载体连接方法动物的选择免疫剂量时间和途径免疫失败的可能原因及应采取的措施抗血清的和保存透射浊胶乳粒子增强浊度测定 第章(TRFIA)*，均相荧光免疫测定，荧光偏振免疫分析法，其他荧光免疫测定。 第十章 放射免疫技术 放射免疫测定：基本原理，技术要点*，评价与应用；免疫放射测定（IRMA）：基本原理，技术类型，技术要点，IRMA与RIA的比较，评价与应用；固相放射免疫测定（SPRIA）：原理，技术类型，技术要点，评价与应用。 第十一章 金免疫技术 胶体金与免疫金的制备：胶体金的特性及其制备，免疫金的特性和制备；金免疫测定技术：斑点金免疫渗滤试验，斑点金免疫层析试验*；金免疫组织化学技术：免疫金（银）光镜染色技术，免疫金电镜染色技术，应用与评价。 第十二章 化学发光免疫技术 发光原理：化学发光，生物发光，光照发光；发光标记物和发光标记技术：发光标记物，发光免疫标记技术；发光免疫分析技术：化学发光免疫分析，化学发光酶免疫分析，生物发光免疫分析，微粒子化学发光免疫分析，电化学发光免疫分析*；免疫传感器：传感器概述，免疫传感器。 第十三章 免疫细胞检测技术 血液标本的采集，外周血液中白细胞的分离，外周血液中单个核细胞的分离，密度梯度离心法原理，技术要点*；淋巴细胞及其亚群的分离纯化：玻璃器皿粘附分离法、吸附过滤法、磁铁吸引法原理及技术要点；其他分离方法；吞噬细胞的分离原理，淋巴细胞的保存与活力测定。 T淋巴细胞表面标志的检测：间接免疫荧光法原理及技术要点*，免疫酶染色技术：亲合素与酶标生物素复合物法、碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法原理，微量细胞毒试验原理，花环技术的原理；卫生学意义与评价。T淋巴细胞受体的检测：总E玫瑰花结和活性E玫瑰花环试验原理，IL-2受体的检测：双抗体夹心ELISA法、ELISA抗原竞争法原理，间接免疫荧光法检测mlL-2R阳性表达细胞的原理。 3H－TdR掺入法、MTT比色法的原理*；T淋巴细胞介导的细胞毒试验：形态学检查法、51Cr释放法原理，CTL介导的细胞凋亡检测法：ELISA及TUNEL法的原理；抑制性T淋巴细胞功能的检测原理及技术要点；T淋巴细胞功能的体内实验检测：特异性抗原、有丝分裂原、二硝基氯苯或二硝基氟苯皮肤试验。 B淋巴细胞表面抗原的检测：Smlg标志的检测：免疫微球法检测Smlg、免疫荧光法测定Smlg、花环形成试验原理。B淋巴细胞功能的体内检测：血清中血型抗体、特异性抗体产生能力的测定，B淋巴细胞功能的体外检测：抗体生成细胞的测定基本原理*；B淋巴细胞早期活化指标的检测；B淋巴细胞增殖试验。 自然杀伤细胞的检测：概述，NK细胞活性检测：同位素法51Cr释放法、乳酸脱氢酶释放法原理*，形态学法，流式细胞仪分析法，测定NK细胞活性的卫生学意义。 吞噬细胞功能的检测：粒细胞功能、中性粒细胞趋化性、中性粒细胞吞噬功能的检测原理，中性粒细胞杀菌功能的检测。巨噬细胞功能的检测：小鼠炭粒廓清试验，吞噬功能的检测原理及技术要点，巨噬细胞溶酶体酶的测定、巨噬细胞促凝血活性的测定、巨噬细胞表面受体、巨噬细胞抗原提呈能力的检测原理以及卫生学意义。 第十四章 细胞因子及其受体的测定 细胞因子检测的方法3H-胸腺嘧啶核苷掺入法MTT法染色法直接计数法原理细胞介导的细胞毒作用检测法：51Cr释放法乳酸脱氢酶释放法3H-TdR释放法细胞凋亡的测定法原理干扰素检测抑制细胞病变活性检测法病毒蚀斑形成实验抑制病毒产量测定干扰素趋化活性测定方法免疫学测定法Western 印迹单个细胞分泌细胞因子的测定细胞内细胞因子的测定分子生物学测定法Southern印迹Northern印迹逆转录聚合酶链反应时荧光定量PCR细胞因子受体检测技术活细胞吸收试验核素标记重组配体的放射受体分析抗受体McAb法重组细胞因子与受体的交联分析受体cDNA分析可溶性细胞因子受体的检测肿瘤坏死因子生物学测定法免疫学测定法干扰素γ的检测抗病毒试验MHC-II类抗原（Ia）诱导法白细胞介素的检测小鼠胸腺细胞增殖法检测IL-1的IL-1免疫学检测法体