[理学]03 生物信息的传递--从DNA到RNA.ppt

RNA基本情况 RNA几乎全是单链形式存在，以各种方式在DNA模板上合成。 RNA有三类 mRNA（极不稳定） rRNA（稳定） 原核生物：5s，16s，23s 真核生物：5s，5.8s,18s，28s tRNA 2、各亚基的特点和功能 （1）σ亚基 可重复使用； 使全酶识别启动子的－35区，并与模板链结合。 E. coli RNA polymerase 1、－35 序列与－10 序列与转录效率的关系 标准启动子 －35 TTGACA －10 TATAAT （1）帽子位点 转录起始位点，其碱基大多为A(非模板链) 功能与Prok.的“CAT模式”相似 （2）TATA框 位于－30处(-29-- -37序列处) 一致序列为T82A97T93A85A63（/T37）A83A50（/T37） 3、RNApol I 启动子结构 RNApol I 负责rRNA的转录 主要由两部分组成（*张玉静与阎隆飞说法不一） 核心启动子 －45～+20 上游调控元件（ UCE） －180 ～ －107 特点： 富含GC对，85%同源性。 启动时，需SL1蛋白参与。 1、RNA Pol I 的转录起始 需两种转录因子 上游结合因子（upstream binding factor, UBF） 特异地识别核心启动子和上游调控元件（UCE）中富含GC对的区域。 选择因子1（SL1）： 由4种蛋白质组成，包括TATA框结合蛋白（TBP蛋白） 本身并没有单独识别特异DNA序列的功能，在UBF与DNA结合后，SL1才可结合上来。 只有当两种辅助因子与DNA结合后，RNA聚合酶I才能与核心启动子结合，从而起始转录。 3、RNApol Ⅲ的转录起始（内部启动子） 四、抗终止的机制 由于不同的生理需要，在转录中即使遇到终止信号，转录仍需继续，于是出现了抗转录终止现象。 在噬菌体感染细菌的中最早发现的。 1、破坏终止位点RNA的茎-环结构 转录-翻译偶联 aa浓度高时，aa-tRNA浓度也高，核糖体能顺利通过密码子，此时mRNA能形成正常的二级结构，包括茎环结构，RNA Pol终止转录； 反之，核糖体滞留在串联密码子上，mRNA不能形成正常的茎环结构，出现转录的抗终止现象。 2、依赖于蛋白质因子的转录抗终止 依赖ρ因子的终止子上游有抗终止信号(靠近PL的nutL，靠近tR1的nutR) 抗终止蛋白（由N基因编码）和nut位点的结合，等待RNApol经过时修饰RNApol的构象，拮抗寄主编码的终止蛋白ρ的活性,使之通过那些依赖ρ的终止子，继续RNA链的合成。 2、 帽子结构的生成 甲基供体：S-腺苷甲硫氨酸（SAM） RNA鸟苷酸基转移酶——戴帽酶 3、 帽子结构的功能 （1）对翻译起识别作用------为核糖体识别RNA提供信号 Cap—0 的全部都是识别的重要信号 Cap—1,2 的甲基化能增进识别 （2）增加mRNA的稳定性，使5’端免遭外切核酸酶的攻击 （3）与某些RNA病毒的正链合成有关（Cap—1、Cap—2 ） 2、 poly(A) 的生成 （1）RNA末端腺苷酸转移酶（poly(A) 聚合酶）催化体－－ATP a、甲基化位点可能是酶识别的标志 b、加工的对象是一种核蛋白 c、哺乳动物的45SRNA前体有几种不同的加工方式 ☆ 单细胞真核生物只有 Cap—0 ☆ Cap—1 是其余真核生物的主要帽子形式 ☆ Cap—2 存在于某些真核生物中 内切酶的识别位点（有其它因子参与） 切点上游 13－20bp处的AAUAAA 切点下游的GUGUGUG（单细胞Euk.除外） 多顺反子(polycistron) 单顺反子（monocistron) 特别地：TBP 的作用 在 RNApolⅠ的转录起始过程中,TBP是SL1的组份，起定位RNApolⅠ的作用 RNApolⅡ的转录起始由TBP识别TATA框 所有RNApolⅢ的转录起始都需要TBP ∵TBP主要作用是定位, ∴又称定位因子（positioning factor） TBPis an universal factor RNA polymerases are positioned at all promoters by a factor that contains TBP. 1、转录泡处新生的RNA链与DNA形成的杂交双链很短 胰脏 RNAase______其长度10bp（不准确） ? 推测也就两个核苷酸左右 Transcription: the synthesis of a single-stranded RNA from a double-stranded DNA