全国基层医疗机构抗菌药物合理应用培训项目-常见病原真菌精选.ppt

病原真菌鉴定的基本流程 区分酵母样或霉样菌落 常见病原真菌 酵母及酵母样真菌 _念珠菌 _隐球菌 _毛孢子菌 _马拉色菌 念 珠 菌 属 简介 念珠菌大约有150个种，65%以上不能在37℃生长，无致病性 念珠菌属可以感染皮肤、粘膜及内脏器官引起念珠菌病 常见的致病性念珠菌 白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌、乳酒念珠菌 临床最常见的是白念珠菌 生物学特性 念珠菌在环境中和人体内均可寄生存在 正常人皮肤、口腔、肠道、肛门、阴道中可分离出本菌 显微镜下表现为芽孢和假菌丝 假菌丝一般与致病相关 寄生时一般表现为孢子相 致病性 条件致病菌 白念珠菌致病力强 念珠菌毒素、菌体形态、黏附性和分泌水解酶与其致病性密切相关 临床表现- 浅部念珠菌病 口腔念珠菌病 念珠菌性女阴阴道炎 念珠菌性龟头炎 皮肤念珠菌病 念珠菌性甲沟炎及甲床炎 慢性粘膜皮肤念珠菌病 念珠菌性角膜炎 临床表现-系统性念珠菌病 支气管、肺念珠菌病 消化道念珠菌病 泌尿道念珠菌病 念珠菌败血症 念珠菌性心内膜炎 念珠菌性脑膜炎 常见病原菌 白念珠菌（Candida albicans） 热带念珠菌（C.tropicalis） 克柔念珠菌（C.krusei） 近平滑念珠菌（C.parapsilosis) 光滑念珠菌 (C.glabrata) 乳酒念珠菌（C.kefyr） 季也蒙念珠菌（C.guilliermondii） 少见病原菌 链状念珠菌（C.catenulata） 西弗念珠菌（C.ciferrii） 海默郎尼念珠菌（C.haemulonii） 解脂念珠菌（C.lipolytica） 葡萄牙念珠菌（C.lusitaniae） 挪威念珠菌（C.norvegensis） 铁红念珠菌（C.pulcherrima） 皱落念珠菌（C.rugosa） 产朊念珠菌（C.utilis） 维丝念珠菌（C.viswanathii） 涎沫念珠菌（C.zeylanoides） 都柏林念珠菌 (C. dubliniensis 组织病理学 实验室检查 直接镜检：可见卵园形发芽孢子及菌丝，如查到大量假菌丝，说明念珠菌处于致病状态。 染色：革兰氏染色，菌丝、芽孢呈蓝色，着色不均匀。过碘酸染色，菌丝、芽孢染成红色。用1:1000吖啶橙染色，在荧光显微镜下，菌体呈现荧光。 培养：最常用的培养基是沙堡氏培基，当菌落生长后再移种至米粉吐温80培基或其它鉴定培养基中，以便进一步鉴定菌种。 念珠菌直接镜检（LPCB） 致病性酵母菌鉴定原则 鉴定目的：确定感染及传染源；选择敏感抗真菌药物； 哪些酵母菌需要鉴定到种： 所有分离自无菌体液，包括脑脊液、血液、尿液、穿刺液及其它体液的酵母菌； 分离自所有严重疾患或免疫受损病人或怀疑真菌感染的病人的酵母菌； 从任何临床标本中分离出大量的酵母菌； 分自若干连续取材的标本，除呼吸道分泌物，也应鉴定至种的水平； 芽管试验（Germ-tube test） 原理：白念珠菌在有营养的液体环境中35℃培养，可从酵母细胞生出芽管。 结果：白念珠菌可在2h内生成芽管，热带念珠菌和其他念珠菌则否。 厚膜孢子形成试验（Dalmo plate test） 念珠菌显色培养基CHROMagar Candida API—20C酵母鉴定系统 ID32C 酵母鉴定系统 其它快速同化试剂 VITEK全自动微生物鉴定仪 YBC酵母菌鉴定卡。 有30个孔的一次性塑料卡，包括26个常规生化反应和4个阴性质控。 利用YBC，只有21.3%的酵母需做补充生化试验或形态学检查。 白念珠菌 菌落特征 沙氏培养基25℃中等速度生长，形成酵母样菌落，奶油样、光滑、闪光，老后有皱褶 显色琼脂基上呈绿色菌落 显微镜特征 玉米粉吐温琼脂：真菌丝和假菌丝，多数假菌丝，假菌丝连接处产生多数呈簇状、葡萄状小分生孢子，顶端或侧支产生厚壁孢子 血清芽管试验，在37℃1-3小时后，可以产生芽管 白念珠菌(Candida albicans) 酵母菌鉴定程序和路线 血清学试验-菌种鉴定 抗原型别： —因子血清（CANDIDA CHECK）：九种因子+蔗糖分解，鉴别7种致病性念珠菌； —因子血清（CRYPTO CHECK）：八种因子，可鉴别8种隐球菌及变种 分子生物学方法 小结—酵母菌鉴定依据 传统 菌落颜色、外观 镜下细胞形态、大小 有无荚膜 有无假菌丝和菌丝 芽管形成和厚膜孢子形成 碳源同化、发酵 氮源同化、发酵 敏感药物 两性霉素B 唑类抗真菌药物 棘白菌素类药物 隐 球 菌 隐球菌属(Cryptococcus)特点 本属的共同特征为细胞呈圆形或卵圆形，偶有伸长形或多样形，呈多边芽殖。 大部分菌株有荚膜。 所有菌种都能同化肌醇并在