气质联用篇.PDFVIP

3.2.2 气质联用篇 应用 GC/MS 及安捷伦 Fiehn GC/MS 代谢组学 RTL 数据库鉴 定血浆中的代谢物 应用通讯 作者 摘要 Mine Palazoglu 和 Oliver Fiehn 气相色谱 质谱（ ）联用技术可为代谢组学研究提供高分离能力和高灵敏度。代谢组学筛选 加州大学戴维斯分校基因研究中心 / GC/MS 的效用很大程度上取决于被鉴定代谢物的数目并与其生物学解释有关。通常，最难的步骤是对这些 Davis, CA 95618 代谢物进行鉴定。必威体育精装版的安捷伦 Fiehn GC/MS 代谢组学 RTL （保留时间锁定）数据库正是专为简 化代谢物鉴定而开发的一款数据库。 本文以人血浆样品为例阐释了复杂生物基体中代谢物的鉴定。通过质谱解卷积和快捷、灵活、高通 量的安捷伦 Fiehn 谱库检索匹配，对常规的鉴定流程进行补充。判断鉴定结果是否准确的一个最重 要指标就是样品保留时间，即通过与内标物 d27-肉豆蔻酸的绝对保留时间进行锁定判断保留时间 的一致性。安捷伦 Fiehn 谱库特有的保留时间锁定技术增加了鉴定结果的可信度。平均保留时间偏 差小于 0.15 min ，更是增加了代谢物鉴定结果的可靠性和可信度。正如NIH/NIDDK 和代谢组学学 会近期所建议的那样，采取类似措施对化合物鉴定程序进行补充，在代谢物鉴定报告的规范化过程 中发挥着越来越重要的作用。 1 引言 内分解代谢和生物合成途径的活性来解释各固 GC/MS 条件如下 ：6890 GC 柱温箱从 60°C 有中间代谢产物的相对丰度。因此，代谢组学 以 10°C/min 速率升至 325°C （含启动 时间 即使使用现代仪器 ，对复杂生物基体中小分子 筛选的效用很大程度上取决于被鉴定代谢物的 1 min 和最终平衡时间 10 min），整个过程共 代谢物（30-1500 Da）的全面定性与定量，即 数量以及其相关的生物学解释。本文使用一种 37.5 min ，再冷却至60°C。用 10 µL 进样针 ， “代谢组学”，依然是分析化学中极具挑战性的 溶剂混合物实现蛋白质的沉淀和提取，随后进 采用分流/不分流进样口，进样体积为 1 µL， 课题 。单一的方法无法完成此项任务 。例如， 行化学衍生化、GC/MS 分析、谱图解卷积数 进样口温度为 250°C ，每次进样泵取 4 次，进 萜烯类等强挥发性物质不能使用以液相色谱进 据处理，再通过对一系列代谢产物列表进行验 样前后都用溶剂 A 和溶剂 B 洗针 ，洗针次数分 行分析，而必须使用气相色谱。同样，液相色 证，鉴定了人血浆中的代谢物，并演示了外部 别为 1 次和 2 次。使用高柱塞速度，无粘度延 谱比毛细管电泳 （ ）技术更适 于分离多酚