用大豆粉替代市售尿素酶测定洗洁精中的尿素含量.docxVIP

PAGE  PAGE 13 用大豆粉替代市售尿素酶测定洗洁精中的尿素含量 摘要： 建立了一种用大豆粉代替市售尿素酶测定洗洁精中尿素含量的新方法。跟踪测试了大豆粉的酶活性及其稳定性，考察了大豆粉的加入量、反应时间等对测定结果的影响。经验证新方法重复性好，准确度高，与国家标准GB9985-2000《手洗餐具用洗涤剂》中测定尿素的方法进行了比较，检测结果一致。但新方法更为经济适用，在保证结果准确、操作简便的同时能极大地降低检测成本。 关键词： 大豆粉 尿素酶 洗洁精 尿素含量 前 言 一、本课题背景： 常用的洗洁精中一般都含有尿素，尿素是增加有机物质溶解在水中的有效增溶剂。在液体洗涤剂中添加尿素，还可提高产品贮藏稳定性。 表面活性剂是洗洁精的主要有效成分，其种类和含量直接影响到洗洁精的去污洗涤效果。在洗洁精国家标准GB9985-2000《手洗餐具洗涤剂》中规定了总活性物含量指标要求和测定方法。在测定洗洁精总活性物含量时，是以乙醇溶解物的量为依据的，因尿素和表面活性剂均能溶解在乙醇中，而且尿素价格比表面活性剂便宜很多，一些不法商人往往会用增加尿素的量来提高产品总活性物含量，以次充好。另外，如果尿素含量过高时易导致洗洁精出现不同程度的质量问题，如PH过高或微生物作用会使尿素分解，逸出氨味，致使产品变味，继而生成白色沉淀或有絮状物析出等。针对这种情况，国家标准GB9985-2000中规定，用乙醇法测定总活性物含量时，要求测定尿素的含量，并在最终结果中扣除。因此测定洗洁精中尿素含量显得尤其重要。 GB9985-2000中测定尿素含量的方法是用尿素酶将尿素分解为铵盐，用酸滴定，由此计算其含量。该方法中需要用到的尿素酶，市售尿素酶一般为生化试剂，来源较少，往往依赖国外进口，价格昂贵，从网上的一些报价来看，每克的价格从上百元到上千元不等，这就造成了不但检测成本极高，而且受供应商的制约，对检测工作带来很多不便。例如，在某知名国际第三方检测机构，测定洗洁精活性物含量，如不需测定尿素含量，其检测价格为300元，而如需测定尿素含量，则检测价格猛增为2000元。对于洗洁精生产企业来说，活性物含量是其日常质量监控的重要指标，因而检测成本很高。 二、本课题内容 针对上述问题，考虑到如果能找到其他东西来代替昂贵的尿素酶，不就可以大大降低检测成本了吗？经查阅有关资料发现，尿素酶广泛分布于 HYPERLINK /z/Search.e?sp=S%E6%A4%8D%E7%89%A9%E7%9A%84%E7%A7%8D%E5%AD%90ch=w.search.yjjlinkcid=w.search.yjjlink \t _blank 植物的种子中，尤其在 HYPERLINK /z/Search.e?sp=S%E5%A4%A7%E8%B1%86ch=w.search.yjjlinkcid=w.search.yjjlink \t _blank 大豆、 HYPERLINK /z/Search.e?sp=S%E5%88%80%E8%B1%86ch=w.search.yjjlinkcid=w.search.yjjlink \t _blank 刀豆中含量丰富，市售尿素酶也往往是从大豆中提取的。既然大豆中含有尿素酶，那么是否可以直接用廉价的大豆来替代尿素酶测定尿素含量，如果可行，就可大大节约检测成本，而且大豆来源广泛，随处可得，给检测工作带来了便捷。 本课题希望建立利用大豆粉来测定洗洁精中尿素含量的方法，主要需要进行以下方面的研究： 1、测试大豆粉的酶活性。大豆中含有足够活力的尿素酶是本课题可实现的前提。 2、考察在一定的储存条件下大豆粉中酶活性的稳定性。只有酶活性在较长时间内是稳定的，才有可能用于日常测定。 3、确定测定尿素含量时所需要的大豆粉的加入量。通过对加入不同量的大豆粉试验，确定测定不同含量尿素时大豆粉的最佳加入量。 4、考察利用大豆粉测定洗洁精中尿素含量的准确性和重复性。 5、与国标方法使用市购的尿素酶比较，评价本课题所建立的方法在测定不同洗洁精样品中结果的一致性。 实 验 部 分 1、方法原理 在一定条件下，尿素被能大豆粉中所含的尿素酶分解成氨气和二氧化碳，在水中形成碳酸铵。 先用过量的盐酸中和尿素水解产生的碳酸铵，然后再用氢氧化钠标准溶液回滴过量的盐酸，根据所耗用氢氧化钠标准溶液的量，与空白实验比较，就可以求得洗洁精试样中尿素的含量。 尿素酶 尿素水解反应方程式：CO(NH2) 2+ 2H2O ( （NH4) 2CO3 中和反应方程式： (NH4) 2CO3+2HCl→2NH4Cl+H2O+CO2↑ NaOH+HCl → NaCl+ H2O 2、仪器设备 2.1粉碎机：中药粉碎机(刀片:123,翘